中华人民共和国国家标准
GB 23200.51-2016
食品安全国家标准 食品中呋虫胺残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法
National food safety standards
Determination of dinotefuran residue in foods
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 中华人民共和国农业部 国家食品药品监督管理总局
发布
前言
本标准代替SN/T2231-2008《食品中呋虫胺残留量的测定气相色谱一质谱法》. 本标准与SN/T2231-2008相比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式：一标准名称中“出口食品”改为“食品”：一标准范围中增加“其它食品可参照执行”.本标准所代替标准的历次版本发布情况为： -SN/T22312008.
食品安全国家标准
食品中呋虫胺残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法
1范围
本标准规定了进出口食品中呋虫胺残留量的制样和液相色谱-质谱/质谱检测方法. 本标准适用于小麦、花生、玉米、菠菜、苹果、胡萝卜、紫苏叶、猪肉及马哈鱼中呋虫胺残留量的检测和确证.其它食品可参照执行.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法.
3原理
样品用乙晴提取，提取液加入无水硫酸钠脱水后，用石墨化非多孔碳柱（Envi-Carb）/酰胺丙基甲硅烷基化硅胶柱（LC-NH）净化，液相色谱-质谱/质谱法测定，外标法定量.
4试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水.
4.1试剂
4.1.1乙睛（CHN）：色谱纯.4.1.2正已烷（CgH）：色谱纯. 4.1.3丙酮（CHO）：色谱纯.4.1.4乙醚（CHO）：色谱纯.4.1.6无水硫酸钠（NaSOg）：分析纯，650C灼烧4h，自然冷却后贮于密封瓶中备用. 4.1.5氯化钠（NaCI）：优级纯.4.1.7磷酸氢二钾（KHPO4）：分析纯.4.1.8磷酸二氢钾（KHPO）：分析纯.4.1.9氢氧化钠（NaOH）：分析纯. 4.1.10盐酸（HCI）：优级纯.
4.2溶液配制
4.2.11mol/L氢氧化钠：称取40g氢氧化钠，溶于1L水中. 4.2.21mol/L盐酸：称取36.5g纯盐酸，溶于1L水中.4.2.3正已烷饱和的已晴：在250mL的分液漏斗中分别加入100mlL乙晴和100mlL正已烷，充分振摇，静置分层，下层为正已烷饱和乙睛. 4.2.4丙酮-正已烷（11，V/V）：将等体积丙酮和正已烷混合，充分振摇.4.2.5磷酸缓冲液：0.5mol/L（pH=7.0），称取52.7g磷酸氢二钾和30.2g磷酸二氢钾，加入约500mL水溶解，用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸调整pH7.0后，加水定容至1L.
4.3标准品
4.3.1呋虫胺标准物质：（dinotefuran，CHN0），CAS NO：165252-70-0，纯度大于等于98%.
4.4标准溶液配制
4.4.1呋虫胺标准储备液：称取适量呋虫胺标准品，用丙酮-正已烷（11，V/V）配制成1.0mg/mL的标
准储备液：0~4°℃保存.保存期一年.4.4.2呋虫胺标准工作液：根据需要用丙酮-正已烷（11，V/V）将储备液稀释配制成适用浓度的标准 工作液.0～4°℃保存.保存期一个月.
4.5材料
4.5.1 Envi-Carb/LC-NH2固相萃取柱：500 mg/500 mg.Supelclean ENVI-Carb SPE9（石墨化非多孔4.5.2滤膜：0.2 μm. 碳)与SupelcleanLC-NH:SPE（酰胺丙基甲硅烷基化硅胶）串联.
5仪器和设备
5.1液相色谱-质谱/质谱联用仪：配备电喷雾离子源（ESI）.5.2分析天平：感量0.01g和10.0001g.5.3涡混合器. 5.4旋转蒸发仪.5.5高速均质器.10000转/分.5.6离心机. 5.7离心管：100ml.5.8分液漏斗：250ml、150ml.5.9粮谷粉碎机.5.10食品搞碎机. 5.11花生粉碎机.5.12振荡器.
6试样制备与保存
6.1试样制备
6.1.1小麦、玉米
取有代表性样品约500g，用粉碎机全部粉碎并通过2.0mm圆孔筛.混匀，装入洁净的容器内，密闭，标明标记.
6.1.2水果、蔬菜、鱼、肉
取有代表性样品约500g，切碎后，用食品捣碎机将样品加工成浆状.混匀，装入洁净的容器内，密闭，标明标记.
6.1.3花生
取有代表性样品500g，用磨碎机全部磨碎.混匀，装入洁净的容器内，密闭，标明标记. 注：以上样品取样部位按G82763附录A执行.
6.2试样保存
小麦、玉米、花生试样于0～4C保存：鱼、肉及水果和蔬菜类试样于-18C以下冷冻保存.在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化.
7分析步骤
7.1提取
7.1.1小麦、玉米、花生
r/min均质提取1min，离心3min，提取液过滤至250mL分液漏斗中，残留物再用20mL乙晴重复提取一 称取5g试样（精确至0.01g）于100mlL离心管中，加20mL水，放置5min.加30mL乙睛，于10000次.合并提取液于分液漏斗中，依次加入20g氯化钠和60mL磷酸缓冲液，振摇3min.静置后，弃去水层.乙晴层加入5g无水硫酸钠脱水后于40C旋转浓缩至近干.
7.1.2水果、蔬菜
称取10g试样（精确至0.01g）于100ml离心管中，加30mL乙睛，于10000r/min均质提取1min，离心3min，提取液过滤至250mL分液漏斗中，残留物再用20mL乙晴重复提取一次.合并提取液于分液漏斗中，依次加入20g氯化钠和60mL磷酸缓冲液，振摇3min.静置后，弃去水层.乙层加入5g无 水硫酸钠脱水后于40C旋转浓缩至近干.
7.1.3鱼、肉
15min，离心3min，提取液过滤至250mL分液漏斗中，残留物再用20mL乙腊重复提取一次.合并提取 称取10g试样（精确至0.01g）于100mL离心管中，加30mL乙腊，涡混合均匀后于超声波中提取液于分液漏斗中，依次加入20g氯化钠和60mL磷酸缓冲液，振摇3min.静置后，弃去水层.乙层加入5g无水硫酸钠脱水后于40C旋转浓缩至近干.
7.2净化
7.2.1小麦、玉米、花生、鱼、肉
提取物用20mL正已烷溶解残留物，转入150mlL分液漏斗中，分别用20mL正已烷饱和乙晴对溶解液萃取2次，取下层溶液合并萃取液，40C减压浓缩干.加入2mL乙躺溶解.
再用20mL乙晴淋洗，收集洗脱液，于40C旋转浓缩至近干，残留物用2.0ml乙晴溶解，过0.2um滤 用10mL乙预淋洗Envi-carb/LC-NH（500mg/500mg）小柱，弃去流出液.注入上述所得溶液，膜，供液相色谱-质谱测定.
7.2.2蔬菜、水果
用10mL乙预淋洗Envi-carb/LC-NH（500mg/500mg）小柱，弃去流出液.注入上述所得溶液，再用20mL乙晴淋洗，收集洗脱液，于40C旋转浓缩至近干，残留物用2.0mlL乙腊溶解，过0.2um滤膜，供液相色谱-质谱测定.
7.3测定
7.3.1气相色谱-质谱参考条件
a.色谱柱：Waters Acquity Uplc BEH C8 1.7 μmb.流动相：水（A）乙睛（B）梯度
表1流动相梯度
时间/nin 流速/nlL/nin %A %B0.00 0.30 0.25 0.25 60 60 40 402. 00 0.25 30 702. 50 0.25 60 40
c. 柱温：30℃.e.进样量：10叫. d. 流速：0.2ml/min.g.质谱条件 f.运行时间：3.5min参见附录A.
7.3.2色谱测定与确证
测定，标准工作溶液和待测样液中呋虫胺的响应值均应在仪器检测的线性范围内. 根据样液中被测物含量，选定浓度相近的标准工作溶液，对标准工作溶液与样液等体积参插进样
如果样液与标准工作溶液的质量色谱图中，在相同保留时间有色谱峰出现，所选离子均出现，所选择离子的丰度比与标准品对应离子的丰度比，其值在允许范围内（允许范围见表1）.在7.3.1条件 下，呋虫胺保留时间是0.6min，在7.3.1条件下，呋虫胺标准物的液相色谱-质谱谱图见附录B.
表2使用定性液相色谱-质谱时相对离子丰度最大允许偏差
相对离子丰度 >50% >20%至50% >10%至20% ≤10%允许的相对偏差 ± 20 % ±25% ±30% ±50%
7.4空白实验
除不加试样外，均按上述测定步骤进行.
8结果计算和表述
用色谱数据处理机或按式（1）计算样品中呋虫胺残留量.
