中华人民共和国国家标准
GB 31656.24-2025
食品安全国家标准 水产品中喹诺酮类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
National food safety standardDetermination of quinolones residues in aquatic products by liquidchromatography-tandem mass spectrometric method
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
食品安全国家标准 水产品中喹诺酮类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件规定了水产品中喹诺酮类药物残留量检测的制样和液相色谱-申联质谱测定方法.
本文件适用于鱼类肌肉和皮等可食组织，虾、蟹、贝、蛙、鳖、海参可食组织中喹酸、氯甲喹、诺氟沙星、依诺沙星、环丙沙星、培氟沙星、洛美沙星、达氟沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、司帕沙星、二氯沙星、西诺沙星、茶啶酸、奥比沙星、马波沙星、氟罗沙星、吡哌酸残留量的检测.其他水产品的检测可参照执行.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，件. 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T30891-2014水产品抽样规范
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
联质谱法测定，基质校准内标法定量. 试料中残留的喹诺酮类药物用酸化乙晴提取，正已烷脱脂亲水亲脂固相萃取柱净化，液相色谱-串
5试剂与材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1乙晴（CH CN）：色谱纯.5.1.2正已烷（CH）：色谱纯.5.1.3甲酸（HCOOH）：色谐纯.5.1.4乙酸铵（CH COONH）.5.1.5磷酸（H PO）.5.1.6氨水（NHHO）.5.1.8氢氧化钠（NaOH). 5.1.7甲醇（CHOH）：色谱纯.5.1.9二水合磷酸二氢钠（NaHPO2HO）.5.1.10无水硫酸钠（NaSO）经550C灼烧4h，冷却4h后，储于密闭容器中备用.
5.2.1酸化乙晴：99mL乙晴中加人1mL甲酸，混合均匀.5.2.20.1mol/L氢氧化钠溶液；取氢氧化钠4.00g.用水溶解并稀释至1000mL.
5.2.30.05mol/L磷酸盐缓冲溶液（pH7.0）：取二水合磷酸二氢钠1.56g.加人氢氧化钠溶液79mL，混匀，用水稀释至200mL.5.2.4氨化甲醇：取氨水25mL，用甲醇稀释至100mL.5.2.5乙晴饱和正已烷：取正已烷200mL于250mL分液漏斗中，加人适量乙晴后，剧烈振摇，待分配平 衡后，弃去乙晴层，即得.5.2.60.1%甲酸水溶液（含0.002mol/L.乙酸铵）：取乙酸铵1.54g，用水溶解并稀释至1000mL.从中取100mL乙酸铵溶液，取甲酸1mL，再用水稀释至1000mL.5.2.7复溶液：取乙晴15mL.取0.1%甲酸水溶液（含0.002mol/L乙酸铵）85mL.混合均匀.
5.3.1喹酸、氟甲唑、诺氟沙星、依诺沙星、环丙沙星、洛美沙星、达氟沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、司帕沙星、二氟沙星、西诺沙星、茶啶酸、奥比沙星、马波沙星、氟罗沙星、毗哌酸含量均≥97.0%，培氟 沙星含量≥92.0%，详见附录A.5.3.2诺氟沙星-D5、环丙沙星-D8、恩诺沙星-D5含量均≥99.0%，详见附录A.
5.4标准溶液制备
5.4.1标准储备液：取恶座酸、氟甲喹、诺氟沙星、依诺沙星、环丙沙星、培氟沙星、洛美沙星、达氟沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、司帕沙星、二氟沙星、西诺沙星、萘啶酸、奥比沙星、马波沙星、氟罗沙星、毗哌至100mL棕色容量瓶，配制成浓度为100μg/mL标准储备液.-18°C以下避光保存，有效期6个月. 酸标准品各适量（相当于各活性成分10mg），精密称定，在加入200gL甲酸条件下，用乙晴溶解稀释定容5.4.2混合标准中间液：分别精密量取标准储备液1mL.于10mL棕色量瓶中.用乙晴稀释至刻度，配制成浓度为10μg/mL标准中间液.-18℃以下避光保存，有效期3个月.5.4.3混合标准工作液：精密量取标准中间液1mL，于10mL棕色量瓶中.用乙晴稀释至刻度，配制成5.4.4内标标准储备液：取氟代诺氟沙星、尔代环丙沙星、氛代恩诺沙星各10mg，精密称定，在加人200 浓度为1μg/mL混合标准工作液，4℃以下避光保存，有效期1个月.pL甲酸条件下，用乙晴溶解稀释定容至100 mL棕色容量瓶，配制成浓度为100pg/mL内标标准储备液.一18℃以下避光保存，有效期6个月.5.4.5混合内标标准中间液：分别精密量取内标标准储备液1mL.于10mL棕色量瓶中，用乙晴稀释至刻度，配制成浓度为10μg/mL内标标准中间液.一18C以下避光保存，有效期3个月.5.4.6混合内标标准工作液：精密量取内标标准中间液1mL.于10mL棕色量瓶中.用乙晴稀释至刻
度，配制成浓度为1μg/mL混合内标标准工作液.4℃以下避光保存，有效期1个月.
5.5.1反相混合型亲水亲脂固相萃取柱：60mg/3mL，或相当者.5.5.2尼龙微孔滤膜：0.22pm
6仅器和设备
6.1液相色谱-申联质诺仪：配电喷雾离子源.6.2分析天平：感量0.00001g和0 01g.6.3超声波清洗仪，6.4低速离心机：转速可达4000r/min.6.5高速离心机：转速可达15000r/min.6.6移液枪：200gxl，1 mL，5ml.6.7旋转蒸发仪.6.8涡旋混合器. 2
