中华人民共和国国家标准
GB 31657.11-2025
食品安全国家标准 蜂产品中红霉素及其降解产物 残留量的测定液相色谱-串联质谱法
National food safety standardDetermination of erythromycin and its degradation products inhoney androyal jelly-Liqiud chromatography tandem mass spectrometry
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
食品安全国家标准 蜂产品中红霉素及其降解产物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
1范围
谱测定方法. 本文件规定了蜂蜜和蜂王浆中红霉素A及其降解物（脱水红霉素A）检测的制样和液相色谐-串联质
本文件适用于蜂蜜和蜂王浆中红霉素A及其降解物（脱水红霉素A）残留量的测定.
2规范性引用文件
该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件中内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试样中的红霉素A及其降解物用乙晴-水溶液提取，分散固相萃取净化，液相色谱-串联质谱测定，基质校正外标法定量.
5试剂和材料
5.1试剂
以下所用试剂，除特殊注明外均为分析纯试剂，水为符合GB/T6682中规定的一级水.5.1.1甲醇（CHOH）：色谱纯5.1.2乙晴（CHCN）：色谱纯.5.1.3甲酸（HCOOH）：色谱纯.5.1.4氯化钠（NaCl).5.1.5无水硫酸镁（MgSO）.5.1.6无水硫酸钠（Na:SO）.5.1.7红霉素A（英文名：ErythromycinA.分子式：CHNOCAS号：114-07-8）、脱水红霉素A（英文 名：Anhydroerythromycin A，分子式：CH;NO，CAS号：23893-13-2)，纯度均≥99 0%
5.2溶液配制
5.2.10.1%甲酸溶液：取1mL甲酸用水稀释至1000mL.5.2.2红霉素A及其降解物混合标准储备溶液（1mg/mL）：分别准确称取10mg（精确至0.01mg）的红霉素A、脱水红霉素A，用甲醇溶解并定容至10mL，混匀.一18C避光保存，有效期3个月.5.2.3红霉素A及其降解物混合标准工作液（10gg/mL）：精密量取0.1mL标准储备溶液用甲醇稀释.
GB 31657. 11-2025
6仪器设备
6.2天平：感量0.01 mg 和0.01 g. 6.1液相色谱-申联质诺仪：配有电喷雾离子源（ESI）.6.3高速离心机：转速不低于10000r/min.
7试样的制备与保存
a）蜂蜜：将样品（若有结晶，低于45C水浴融化）搅拌均匀，取0.5kg置于样品瓶中，4C密封保存.b）蜂王浆：将样品室湿解冻并搅拌均匀，取0.5kg置于样品瓶中，-18C冷冻保存.
8试验步骤
8.1试样溶液的制备
称取蜂蜜试料（5士0.05）g、蜂王浆试料（2士0.02）g分别置于50mL离心管中，加人5mL水，涡旋30 s，再加入10mL乙晴，于超声波清洗器中超声10min，加人4g无水MgSO.和1gNaCl，涡旋1min， 9 000 r/min 离心 10 min 取 5 mL 上清液 用 400 mg PSA 和 1 200 mg MgSO; 净化 涡旋 30 s8 000 r/min离心5min后取上清液过0.22μm滤膜到样品瓶中，LC-MS/MS测定.
8.2基质匹配混合标准系列溶液的制备
精密量取混合标准工作液适量，分别加人经提取和净化的蜂蜜或蜂王浆空白试料提取溶液中，40℃水浴氮气吹干，加人乙晴涡旋溶解残余物，配制成浓度为2ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的基质匹配系列混合标准溶液，微孔滤膜过滤，供液相色谱-串联质谱测定.以待测物的峰面积为纵坐标、 相应的标准溶液浓度为横坐标，绘制基质匹配标准曲线，计算回归方程和相关系数.
8.3测定
8.3.1液相色谱参考条件
a）色谱柱：C，柱长100mm，内径3.0mm，粒度2.7μm或性能相当者；c）流速：0.3ml/min: b）流动相：A为0.1%甲酸溶液（5.2.1），B为甲醇（5.1.1)，梯度洗脱程序参见表1：d）进样量：2pL；e)柱温：30℃.
表1梯度洗脱程序
时间，min A B %0 55 40 60 451 4 25 755 7 2 2 98 987. 1 55 459 0 55 45
8.3.2质谱参考条件
质诺参考条件如下：
a）离子源：电喷雾离子源：b）扫描方式：正离子模式（ESI）；c）干燥气温度：250℃；d）干燥器流速：151./min;e）毛细管电压：3500V；
