中华人民共和国国家标准
GB 31659.7-2025
食品安全国家标准 禽蛋中氯霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
National food safety standardDetermination of chloramphenicol residue in poultry eggs by liquidchromatography-tandem mass spectrometry method
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2025《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
食品安全国家标准 禽蛋中氯霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件规定了禽蛋中氯霉素残留量检测的制样和液相色谱-申联质谱测定方法. 本文件适用于鸡蛋、鸭蛋、鹅蛋、鹤鹑蛋中氯霉素残留量的测定，其他禽蛋的检测可参照执行.
2规范性引用文件
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文件，文件，
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试样中残留的氯霉素经乙晴提取，乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）和十八烷基硅烷键合硅胶（C）分散固相萃取净化，液相色谱-申联质谱仪测定，内标法定量.
5试剂与材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1乙晴（CH CN）：色谱纯，5.1.2甲醇（CHOH）：色谱纯. 5.1.3甲酸（HCOOH）：色谐纯.5.1.4氯化钠（NaCI).
5.2.150%乙晴溶液：取乙睛50mL 加水稀释至100ml.
5.3.1氯霉素（Chloramphenicol，CH：Cl:N;O;，CAS号：56-75-7），纯度≥99.0%，或经国家认证并授5.3. 2氯霉素-D （Chloramphenicol-D，CHD Cl;NO，CAS号202480-68-0)，纯度≥98.0% 予标准物质证书的相当者.
5.4.1氯霉素标准储备液：取氯霉素标准品适量（相当于活性成分约10mg），精密称定，用甲醇适量使溶解并稀释定容至10mL容量瓶中，配制成浓度为1mg/mL标准储备液，-18C以下避光保存，有效期12个月，
5.4.2内标储备液：取氯霉素-D 标准品约1mg.精密称定用甲醇适量使溶解并稀释定容至10mL容量瓶中，配制成浓度为100pg/mL内标储备液，一18C以下避光保存，有效期12个月.
GB 31659. 7-2025
5.4.3氯霉素标准中间液：精密量取氯霉素标准储备液1mL，于100mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配制成浓度为10μg/mL标准中间液，一18℃以下避光保存，有效期6个月.5.4.4内标中间液：精密量取内标储备液1mL，于100mL容量瓶中.用甲醇稀释至刻度，配制成浓度为1μg/mL内标中间液，-18C以下避光保存，有效期6个月.配制成浓度为100ng/mL的标准工作液，0°℃～4C避光保存，有效期7d.5.4.6内标工作液：精密量取内标中间液200pL，于10mL容量瓶中，用甲醇稀释定容至刻度，配制成浓度为20ng/mL的内标工作液，0℃~4C避光保存，有效期7d.
5.5.2十八烷基硅烷键合硅胶（C）：粒径40m. 5.5.1乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）：粒径40μm5.5.3尼龙微孔滤膜：0.22μm，或相当者.
6仪器和设备
6.1液相色语-串联质诺仪：配电喷雾离子源.6.2分析天平：感量分别为0.00001g和0.01g. 6.3氮气吹干仪.6.4涡旋混合器.6.5快速振荡器.6.6匀浆机.6.7离心机：离心力不小于7100×g（或转速不低于8000r/min）.
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
取适量新鲜的空白或供试禽蛋，去壳，于匀浆机充分混匀.a）取混匀后的供试样品，作为供试试样；b）取混匀后的空白样品，作为空白试样；c）取混匀后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作溶液，作为空白添加试样.
7.2试样的保存
-18℃以下保存.
8测定步骤
8.1提取
5.0 g氯化钠，涡旋混匀1min，剧烈振荡10min，7100×g离心10 min，取乙晴层备用.
8.2净化
取备用液至混有600mg PSA和600 mgC的50mL离心管中，剧烈振荡10min.7 100×g 离心10min.取上清液于40℃氮气吹干，加人2mL50%乙晴溶液，涡旋30s，过0.22pm滤膜，供液相色谱 串联质诺仪测定.
8.3标准曲线的制备
1μg/L、2.5yg/L、5pg/L、10μg/L、25yg/L，氯霉素-D浓度均为1μg/L系列标准溶液，临用现配，供液相色谱-申联质谱测定，以氯霉素和氯霉素-D：定量离子对的峰面积比为纵坐标、氯霉素标准溶液浓度为2
