GB
中华人民共和国国家标准标准
GB 23200.63-2016代替SN/T 2514-2010
食品安全国家标准 食品中噻酰菌胺残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法
National food safety standards-
Determination of tiadinil residue in foods
ndsueoopin
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 中华人民共和国农业部 国家食品药品监督管理总局
发布
前言
本标准代替SN/T2514-2010《进出口食品中噻酰菌胺农药残留量的测定液相色谱-质谱质谱法》. 本标准与SN/T2514-2010相比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式：一标准范围中增加“其它食品可参照执行”. 本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T .
食品安全国家标准
食品中噻酰菌胺农药残留量的测定液相色谱一质谱/质谱法
1范围
本标准规定了食品中噻酰菌胺农药残留量的液相色谱-质谱/质谱检测方法.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
试样用乙酸乙酯提取，凝胶色谱（GPC）和固相萃取小柱净化，液相色谱-质谱/质谱测定和确证，外标法定量.
4试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水.
4.1试剂
4.1.1环已烷（CgH12，110-82-7）：色谱纯.4.1.3乙晴（CHN，75-05-8）：色谱纯. 4.1.2乙酸乙酯（CHO，141-78-6）：色谱纯.4.1.4甲醇（CHO，67-56-1））：色谱纯.4.1.5无水硫酸钠（NaSO，15124-09-1）：650“C灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，储于密封瓶中 备用.4.1.6氯化钠（NaC1，7647-14-5），
4.2标准品
4.2.1噻酰菌胺（tiadinil）标准品（CHCINOs，CAS号：223580-51-6）：纯度≥97.0%.
4.3标准溶液配制
mg/mL的标准储备液. 4.3.1噻酰菌胺农药标准储备液：准确称取适量噻酰菌胺农药标准物质，用乙晴配制成浓度为1.04.3.2噻酰菌胺标准中间溶液：准确吸取适量标准储备液，用乙腊稀释至浓度为10.0ug/mL的标准中间溶液.4.3.3噻酰菌胺标准工作液：使用前根据需要将标准中间溶液用各种样本的空白基质稀释成适当浓度的标准工作液.
4.4材料
4.4.1氨基固相萃取柱：200mg，3mL和500mg，3mL，或相当者.临用前用乙晴将氨基柱（200mg）活化2次，每次2mL.在氨基柱（500mg）上填装0.5g无水硫酸钠，临用前用乙酸乙酯活化2次， 每次2mL.
4.4.2CHROMABONDXTR固相萃取柱（大孔径硅藻土填料）：3000mg，15mL，或相当者.
4.4.3微孔滤膜：0.2μm和0.45μm，有机相.
5仪器和设备
5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源.5.2凝胶渗透色谱仪.
5.5高速低温冷冻离心机：10000r/min. 5.4高速均质机.5.6旋转蒸发仪.5.7氮气吹干仪. 5.8旋涡震荡器.5.9聚四氟乙烯塑料离心管：50mL，具塞.5.10玻璃刻度试管，5mL和10mL，具塞. 5.11鸡心瓶：50mL.
5.3分析天平：感量0.01g和0.0001g.
6试样制备与保存
6.1试样制备
6.1.1生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄
取有代表性样品约500g，将其切碎后，用搞碎机加工成浆状.混匀，装入洁净容器，密封，标明标记.
6.1.2大米、板栗、茶叶
取有代表性样品约500g，用粉碎机粉碎并通过孔径2.0mm圆孔筛.混匀，装入洁净容器，密闭，标明标记.
6.1.3牛肉、鸡肉、羊肝、罗非鱼
取有代表性样品约500g，用绞肉机绞碎，混匀，装入洁净容器，密闭，标明标记.
6.1.4番茄酱
取有代表性样品约500g，混匀，装入洁净容器，密闭，标明标记.
6.1.5蜂蜜
取代表性样品约500g，对无结晶的蜂蜜样品将其搅拌均匀：对有结晶析出的蜂蜜样品，在密闭情况下，将样品瓶置于不超过60C的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温， 在融化时必须注意防止水分挥发.装入洁净容器，密封，标明标记.
注：以上样品取样部位按GB2763附录A执行.
6.2试样保存
下冷冻保存.在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化. 茶叶、蜂蜜、粮谷及坚果类等试样于0-4C保存：水果蔬菜类和动物源性食品等试样于-18“C以
7分析步骤
7.1提取
7.1.1生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄、板栗、牛肉、羊肝、鸡肉、罗非鱼、番茄酱
一个50mL离心管，加入10.0mL乙酸乙酯洗匀质器刀头，合并均质液.加入10g无水硫酸钠，振荡 称取10g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加15.0mL乙酸乙酯，匀质提取1min，另取10min.提取液10000r/min离心5min，吸取10.0mL上清液，冰箱0C以下放置10h，过0.45μm有机滤膜，待凝胶渗透色谱净化.
7.1.2大米
称取10g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入10.0mL水，浸泡20min，加15.0mL乙酸乙酯，匀质提取1min，另取一个50mL离心管，加入10.0mL乙酸乙酯洗匀质器刀头，合并均质液.箱0C以下放置10h，再过0.45μm有机滤膜，待凝胶渗透色谱净化. 加入10g无水硫酸钠，振荡10min.将样本提取液10000r/min离心5min，吸取10.0mL上清液，冰
7.1.3茶叶
水硫酸钠，涡旋振荡1min.加入10.0mL乙酸乙酯，涡旋振荡2min，将样本提取液4000r/min离心5 称取2g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入10.0mL水，浸泡20min，再加入1g无min，吸取上清液.再加入10.0mL乙酸乙酯，涡旋振荡2min，4000r/min离心5min，重复提取一次，合并二次的上清液，45C吹氮浓缩至2mL左右，定容至10mL，过0.45um有机滤膜，待凝胶渗透色 谱净化.
7.1.4蜂蜜
固相萃取柱.上样后，将样本液保持5min，用35mL乙酸乙酯分多次淋洗，流速控制为1.0mL/min， 称取2.0g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加3mL水，0.5g氯化钠，震荡混匀，过XTR收集滤液于50mL鸡心瓶中，在45C下减压浓缩至约0.5mL，待净化.
7.2净化
7.2.1生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄、板栗、牛肉、羊肝、鸡肉、罗非鱼、番茄酱、大米、茶叶 将7.1.1、7.1.2、7.1.3的所得溶液10mL，过凝胶渗透色谱仪，收集7~14min的流出液，操作浓缩装置，在45C下浓缩至近干，2mL乙晴定容，作为初净化液.
制为1mL/min，收集全部过柱溶液于吹氮管中，在45C下吹氮浓缩至近干，用甲醇定容至1.0mL，再 将初净化液过氨基柱（200mg）后，用乙晴洗涤收集瓶3次，每次1mL，洗液同样过柱，流速控加入1.0mL去离子水，涡激振荡均匀，过0.2um有机滤膜，待测.
7.2.2蜂蜜
将浓缩液过氨基柱（500mg），4mL乙酸乙酯分三次洗脱，流速控制为1mL/min，收集洗脱液于吹氮管中，在45C下吹氮浓缩干，用甲醇定容至1.0mL，再加入1.0mL去离子水，涡激振荡均匀，过0.2um有机滤膜，待测.
7.3测定
7.3.1凝胶色谱净化条件
7.3.1. 1凝胶净化柱：Bio-Beads，S-X3，300mm×25（内径）mm:38μm~75μm.7.3.1.2浓缩时温度：45℃. 7.3.1.3流动相：环已烷一乙酸乙酯（5050，体积比）.7.3.1.4定容试剂：乙晴.7.3.1.5流速：4.7ml/min. 7.3.1.6进样量：5ml.
7.3.2LC-MS/MS质谱参考条件
7.3.2.1液相色谱参考条件
a）色谱柱：Waters Atlantis Hilic Silica柱，3μm，3.0mm（i.d）×50mm，或相当者.b）柱温：40℃.c）流动相：甲醇一水（9010，体积比）. d）流速：0.30ml/min.e）进样量：10叫.
7.3.2.2质谱测定参考条件
参见附录A.
7.3.3色谱测定与确证
响应值均应在仪器检测线性范围内.标准工作溶液和样液等体积参插进样测定.在上述色谱条件下，噻 根据样液中噻酰菌胺含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液.标准工作溶液和样液中噻酰菌胺酰菌胺的保留时间约为1.01min.被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同实验条件下，如相对丰度与浓度接近的标准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表1规定的范 果样品中待检测物质与标准溶液中对应的保留时间偏差在2.5%之内：且样品谱图中各组分定性离子的围，被确证的样品可判定为噻酰菌胺阳性检出.标准品的质谱图见附录B中图B.1、B.2.
表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
相对丰度（基峰） % 05 >20 %至 50 % >10 %至 20 % ≤10 %允许的相对偏差 ±20 % ±25 % ±30 % ±50 %
7.4空白实验
除不加试样外，均按上述测定步骤进行.
8结果计算和表述
用色谱数据处理机或按下式（1）计算试样中噻酰菌胺农药的含量，计算结果需扣除空白值.
