NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T939-2016代替NY/T939-2005
巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中复原乳的鉴定
Identification of reconstituted milk in pasteurized and UHT milk本文件为参考件以正式纸质版标准为准
中华人民共和国农业部发布
前 言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
与NY/T939-2005相比，主要变化如下：
修改了巴氏杀菌乳中复原乳鉴定的指标值；修改了UHT灭菌乳中复原乳鉴定的指标值；修改了糠氨酸测定前处理方法；增加了糠氨酸的UPLC测定方法：修改了乳果糖的测定方法.
本标准由农业部畜牧业司提出.
本标准由全国畜牧业标准化技术委员会（SAC/TC274）归口.
本标准起草单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、农业部奶产品质量安全风险评估实验室（北京）农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心（北京）.
本标准主要起草人：郑楠、文芳、王加启、李松励、张养东、赵圣国、李明、杨晋辉、陈冲冲、王晓晴、陈美霞、汪慧、兰欣怡、黄萌萌、卜登攀、魏宏阳、李树聪、于建国、周凌云.
本文件为参考件 以正式纸质版标准为准
巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中复原乳的鉴定
1范围
本标准规定了巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中复原乳的鉴定方法. 本标准适用于巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB5009.5食品安全国家标准食品中蛋白质的测定GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T10111随机数的产生及其在产品质量抽样检验中的应用程序
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3. 1
从符合国家有关要求的健康奶畜乳房中，挤出的无任何成分改变的常乳.
3.2 复原乳 本文件为参考件将干燥
性状只发生有限变化的操作.
3. 4
巴氏杀菌pasteurization
为有效杀灭病原性微生物而采用的加工方法，即经低温长时间（63℃~65C，保持30min）或经高温短时间（72℃~76C，保持15s；或80°℃~85℃，保持10s~15s）的处理方式.
3.5
巴氏杀菌乳Pasteurizedmilk
仅以生牛乳为原料，经巴氏杀菌等工序制得的液体产品，其乳果糖含量应小于100mg/L.
3.6
超高温瞬时灭菌ultrahigh-temperature，UHT
保持很短时间的热处理方式. 为有效杀灭微生物和抑制耐热芽孢而采用的加工方法，即在连续流动状态下加热到至少132℃并
3. 7
超高温瞬时灭菌乳（UHT灭菌乳）ultrahigh-temperaturemilk
以生牛乳为原料，添加或不添加复原乳，经超高温瞬时灭菌，再经无菌灌装等工序制成的液体产品.
NY/T 939-2016
生牛乳经UHT灭菌处理后，乳果糖含量应小于600mg/L.
3.8
糖氨酸furosine
牛乳在加热过程中，氨基酸、蛋白质与乳糖通过关拉德反应生成.-N-脱氧乳果糖基-L-赖氨酸（c-N-deoxylactolusyl-L-lysine），经酸水解转换成更稳定的糠氨酸（e-N-2-furoylmethyl-L-lysine，-N-2-呋喃甲基-L-赖氨酸）.
3.9
乳果糖lactulose
牛乳在加热过程中，乳糖在酪蛋白游离氨基的催化下，碱基异构而形成的一种双糖.其化学名称为4-0-β-D-吡嘀半乳糖基-D-果糖，可作为评价牛奶热处理效应的指标.
4试验方法
4.1氨酸含量的测定
4.1.1原理
（UPLC）在紫外（波长280nm）检测器下进行分析，外标法定量.
4.1.2试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的实验室一级水.
4.1.2.8 脱气10min
4.1.2.9乙酸铵（6g/L）含0.1%三氟乙酸溶液：准确称量6g乙酸铵溶于部分水中，加人1mL三氟乙酸，定容至1L，过0.22μm水相滤膜，超声脱气10min.
4.1.2.10糖氨酸标准储备溶液（500.0mg/L）：将糠氨酸标准品按标准品证书提供的肽纯度系数（NetPeptideContent)换算后，用3mol/L盐酸溶液配制成标准储备溶液.一20°C条件下可储存24个月.
示例：
氨酸标准品证书上标注肽纯度系数为69.1%，则称取7.24mg嫌氨酸标准品，用3mol/L盐酸溶液溶解并定容至10ml，标准储备溶液的浓度为 500.0mg/L
4.1.2.11糖氨酸标准工作溶液（2.0mg/L）：移取100pL糠氨酸标准储备溶液于25mL容量瓶，以3mol/L盐酸溶液定容.此标准工作溶液浓度即为2.0mg/L.
4.1.2.12水相滤膜：0.22pum.
4.1.3仪器
4.1.3.2超高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器.
4.1.3.5天平：感量为0.01mg，1mg.
4.1.3.4密封耐热试管：容积为20ml.
4.1.3.6凯氏定氮仅.
4.1.4采样
用于检测的巴氏杀菌乳储存和运输温度为2C～6C，UHT灭菌乳储存和运输温度不高于25℃.
按GB/T10111的规定取不少于250mL样品样品不应受到破坏或者在转运和储藏期间发生变化.监督抽检或仲裁检验等采样应到加工厂抽取成品库的待销产品，1周内测定.
4.1.5分析步骤
4.1.5.1试样水解液的制备
置于干燥箱，在110℃C下加热水解12h~23h.加热约1h后，轻轻摇动试管.加热结束后，将试管从干 吸取2.00mL试样，置于密闭耐热试管中，加人6.00mL10.6mol/L盐酸溶液，混匀.密闭试管，燥箱中取出，冷却后用滤纸过滤，滤液供测定.
4.1.5.2试样水解液中蛋白质含量的测定
移取2.00mL试样水解液，按GB5009.5的规定测定试样溶液中的蛋白质含量.
4.1.5.3试样水解液中糖氨酸含量的测定
上机测定.根据实验室配备的液相色谱仪器，按以下两种方法之一测定：
a）HPLC法测定
1）色谱参考条件
色谱柱：Cs硅胶色谱柱，250mm×4.6mm.5pm粒径，或相当者.
以正式纸质版标准为准1.00 100 0 0 0I 16. 00 1. 00 86.8 13. 23 25.00 16.50 1. 00 1. 00 100 0 0.0 100 0 0 05 30 00 1. 00 100 0 0 0
2）测定
利用流动相A和流动相B的混合液（50：50）以1mL/min的流速平衡色谱系统.然后，用初始流动相平衡系统直至基线平稳.注入10pL3mol/L盐酸溶液，以检测溶剂的 纯度.注人10L待测溶液测定糠氨酸含量，色谱图参见附录A.
b)UPLC法测定
1）色谱参考条件色谱柱：HSST3高强度硅胶颗粒色谱柱，100mm×2.1mm，1.8μm粒径，或相当者.柱温：35℃. 流动相：6g/L乙酸铵含0.1%三氟乙酸水溶液为流动相A，甲醇为流动相B，纯水为流动相C.洗脱条件：流动相A，等度洗脱，0.4mL/min.
2）测定
