中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 5144-2019
Determination of thiencarbazone-methyl residues in foods for exportLC-MS/MSmethod
中华人民共和国海关总署发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任.本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口. 本标准负责起草单位：中华人民共和国石家庄海关.本标准主要起草人：马育松、张海超、艾连峰、窦彩云、李玮、王敬、陈瑞春、郭春海.
出口食品中酮脲磺草盼酯残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法
1范围
本标准规定了出口食品中酮腺磺草盼酯残留量的液相色谐-质谱/质谱测定方法.
酮脉磺草盼酯的确证和定量测定. 本标准适用于玉米、小麦、大豆、糙米、马铃薯、菠菜、梨、葡萄、茶叶、鸡肉、猪肉、鱼肉、鸡肝、牛奶中
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
试样中的酮脲磺草盼酯采用乙睛提取，提取液经石墨化炭黑固相萃取柱或C：固相萃取柱净化，用液相色谱-质谱/质谱仪检测和确证，外标法定量.
4试剂和材料
除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水.
4.1乙晴：色谱级.4.2甲醇：色谱级. 4.3二氯甲烷：色谱级.4.4甲酸：色谱级.4.5氯化钠.4.6无水硫酸钠：650C烘烤4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用.4.80.2%甲酸水溶液：量取2mL甲酸（4.4），用水定容至1000mL.4.9酮豚磺草盼酯标准物质：thiencarbazone-methyl，CAS号：317815-83-1，纯度大于或等于98%.准储备溶液，4C下避光保存.保存.4.12基质空白溶液：将不同基质的阴性空白样品分别按照7.1和7.2净化处理后得到的溶液.4.13基质标准工作溶液：根据实验需要吸取适量的标准中间溶液（4.11），用基质空白溶液稀释成适当浓度的标准工作溶液，现用现配.4.14石墨化炭黑固相萃取柱：250mg，3mL或相当者.
SN/T 5144-2019
4.15C固相萃取柱：500mg，3mL或相当者.4.16微孔滤膜：0.22pm，有机相型.
5仪器和设备
5.1高效液相色谱-质谱/质谱仅：配电喷雾正离子源（ESI十）.5.2组织搞碎机.5.3电子天平：感量分别为0.1mg和0.01g.5.4离心机：转速不低于5000r/min.5.5均质器，转速不小于10000r/min. 5.6涡旋混匀器.5.7氮气吹干仪.5.8固相萃取装置.
6样品制备和保存
6.1制样要求
在制样的过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化.
6.2试样制备
6.2.1梨、葡萄、菠菜和马铃薯
后用捣碎机将样品加工成浆状，混匀，装人洁净的盛样容器内，密封并标明标记. 取代表性样品500g，梨取全果去柄；葡萄取全果；菠菜取整棵去除根部；马铃薯取全薯，将其切碎
6.2.2玉米、小麦、大豆、稳米和茶叶
取有代表性样品500g，玉米、小麦、大豆取整粒，用粉碎机粉碎，混匀，装人洁净的盛样容器内，密封并标明标记.
6.2.3猪肉、鸡肉、鱼肉和鸡肝
取代表性样品500g，猪肉去除骨，包括脂肪含量小于10%的脂肪组：鸡肉去除骨：鱼肉去除骨和鳞；鸡肝取整付.用捣碎机充分捣碎均匀，装入洁净的盛样容器内，密封并标明标记.
6.3试样保存
玉米、小麦、大豆、糙米和茶叶于0℃～4C下保存，梨、葡萄、藏菜、马铃薯、猪肉、鸡肉、鱼肉、鸡肝和牛奶于一18℃下保存.
7测定步骤
7.1提取
7.1.1茶叶
称取1.0g试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，加人4mL水，于混匀器上混匀2min，放置2
30min，加人2g氯化钠和10mL乙腾，10 000r/min均质1min，以5000r/min离心5min，取上层清液转移至25mL容量瓶中，再用10mL乙晴重复以上提取过程，最后用5mL乙晴再次重复提取，合并三次提取液于同一容量瓶中，并用乙躺定容至刻度.分取5mL提取液于40C下氮气流吹至近干，待净化.
7.1.2玉米、小麦、大豆、糙米、菠菜、马铃薯、猪肉、鸡肉、鱼肉和鸡肝
称取2.0g试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，对于玉米、小麦、大豆、糙米加人4mL水，于混匀器上混匀2min，放置30min，加人2g氯化钠和10mL乙，10000r/min均质1min，以5000r/min离心5min，取上层清液转移至25mL容量瓶中，再用10mL乙晴重复以上提取过程，最后 用5mL乙晴再次重复提取，合并三次提取液于同一容量瓶中，并用乙定容至刻度.分取5mL提取液于40℃下氮气流吹至近干，待净化.
7.1.3梨、葡萄和牛奶
均质1min，以5000r/min离心5min，取上层清液转移至25mL容量瓶中，再用10mL乙重复以上 称取5.0g试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，加人2g氯化钠和10mL乙晴，10000r/min提取过程，最后用5mL乙晴再次重复提取，合并三次提取液于同一容量瓶中，并用乙晴定容至刻度.分取5mL提取液于40C下氮气流吹至近十，待净化.
7.2净化
7.2.1玉米、小麦、大豆、糙米、马铃薯、猪肉、鸡肉、鱼肉和牛奶
酸钠，先用5mL乙晴预淋洗小柱，弃去淋洗液.然后将复溶后的样品提取液过柱，并用6mL乙洗 用2mL乙晴（4.1）溶解7.1步骤中所获得的浓缩液，在C固相萃取柱上端装人1cm高的无水硫脱，控制流速为0.5mL/min，收集流出液，在40C下氮吹浓缩至近干.用1.0mL乙溶解残渣，过0.22pm滤膜供液相色请-质语/质谱仅测定.
7.2.2梨、葡萄、菠菜、鸡肝和茶叶
用2mL甲醇-二氯甲烷混合液（4.7）溶解7.1步骤中所获得的浓缩液.在石墨化炭黑固相萃取柱上端装人1cm高的无水硫酸钠，先用5mL甲醇-二氯甲烷混合液（4.7）预淋洗小柱，弃去淋洗液.然后将复溶后的样品提取液过柱，并用6mL甲醇-二氯甲烷混合液（4.7）洗脱，控制流速为0.5mL/min，收集流出液，在40C下氮吹浓缩至近干.用1.0mL乙晴溶解残渣，过0.22um滤膜供液相色谱-质 语/质谱仅测定.
7.3测定
7.3.1液相色请参考条件
液相色谐参考条件如下：
a）色谱柱：C柱，150mm×2.1mm（内径），粒度5μm，或相当者；b）流动相：梯度洗脱程序见表1： c）流速：200pL/min；d）柱温：30℃：e）进样量；10gL
