T/CSTC 中国热带作物学会团体标准
T/CSTC 33-2025
蔬菜和水果中100种农药残留的快速筛查 液相色谱-串联质谱法
Rapid screening of 100 pesticide residues in tropical fruits and vegetablesLiquid
中国热带作物学会 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由中国热带作物学会提出并归口.
本文件起草单位：中国热带农业科学院分析测试中心、海南省现代农业检验检测预警防控中心、三亚市农业技术服务中心.
黄燕霞、钟丽琪、尹桂豪、蒙雪茹、邢孔攀、李晓慧、黎小菊. 本文件主要起草人：张振山、黎舒怀、刘春华、吴学进、龚敏、何婷、李春丽、李萍萍、吴南村、
蔬菜和水果中100种农药残留的快速筛查液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件规定了蔬菜和水果中100种农药残留的快速筛查方法. 本文件适用于蔬菜和水果中克百威等100种农药残留的定性鉴别和定量筛查.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T8855新鲜果蔬取样方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
试样用乙晴提取，提取液经固相萃取净化，液相色谱-质谱联用仪检测，外标法定量.
5试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1乙晴（CHsCN，CAS号：75-05-8），色谱纯.5.1.2甲醇（CHOH，CAS号：67-56-1），色谱纯. 5.1.3乙酸铵（CHCOONH4，CAS号：631-61-8）.
5.2溶液配制
乙酸铵水溶液（5mmol/L）：称取0.385g乙酸铵，用水溶解并稀释至1000mL，摇匀.
5.3标准品
100种农药标准品，见附录A，纯度≥95%
5.4标准溶液配制
配制步骤如下：
a）标准储备溶液（1000mg/L）：准确称取约10mg（精确至0.1mg）各农药标准品，用乙晴（5.1.1）b）混合标准溶液（10.0mg/L）：准确吸取浓度为1000mg/L各标准储备溶液1.00mL于容量瓶 或甲醇（5.1.2）溶解并分别定容至10mL.避光-18°℃及以下条件保存，有效期1年.中，用乙躺或甲醇溶解并定容至100mL.避光-18°℃及以下条件保存，有效期6个月.用乙溶解并定容至10mL.避光-18°C及以下条件保存，有效期1个月.
5.5材料
5.5.1提取管：50mL，含萃取盐2g，或相当者.5.5.2挤压式一步固相萃取柱：3mL，含净化填料180mg，或相当者.5.5.3微孔滤膜（有机相）：13mm×0.22um，或相当者.
6仪器
主要仪器如下：
a)液相色谱-三重四极杆质谱联用仪：配有电喷雾离子源（ESI）：b）分析天平：感量0.1mg和0.01g； c)离心机：转速不低于4000r/min：d组织捣碎机：e)涡旋混合器.
7试样制备
7.1试样制备
方法如下：
a）样品取样部位按照GB2763中的规定执行：一对于个体较小的样品，取样后全部处理： 需去核的样品，取样时先去除果核，再进行后续处理：一一对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处理：一对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品，可在不同部位切取小片或截成小段后处 理：b) 取后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放入组织搞碎机中捣辞成匀浆，放入聚乙烯瓶中，制备好的样品不少于100g
7.2试样储存
将试样按照测试和备用分别置于-18°℃及以下条件保存.
8分析步骤
8.1提取
称取5g试样（精确至0.01g）于提取管（5.5.1）中，加入5mL乙睛，剧烈振荡2min后4000rmin离心5min，吸取1mL上清液于挤压式一步固相萃取柱（5.5.2）中，下接微孔滤膜（5.5.3），以每秒1滴的流速缓慢过滤于进样瓶中，用于测定.
8.2测定
8.2.1液相色谱条件
液相色谱参考条件如下：
1）色谱柱：Cis柱，2.1mm（内径）×50mm，粒径1.7μm，或相当者：2)流动相：A相为乙酸铵水溶液（5.2.1），B相为甲醇，流动相及其梯度条件见表1：3）流速：0.3mL/min: 4）柱温：35°C：5)进样量：5μL.
表1流动相及其梯度条件（V）
时间min 流动相V 流动相VB0.00 90.0 10.01.00 2.00 30.0 90.0 10.0 70.04.00 30.0 70.08.00 5.00 5.00 5.00 95.0 95.09.00 90.0 10.010.0 90.0 10.0
8.2.2质谱条件
质谱参考条件如下：
1）离子源类型：电喷雾离子源：2）扫描方式：正离子和负离子同时扫描：3）电喷雾电压：正源5500V，负源-4500V： 4）离子源温度：550°℃：5）雾化气：344.7kPa:6)辅助加热气：55.2kPa； 7）气帘气：172.4kPa:8)多反应监测：每种农药分别选择至少2个子离子.需要检测的离子对按照出峰顺序，分时段分别检测.每种农药的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数，见附录B.
8.2.3基质匹配标准工作曲线
吸取一定量的混合标准溶液，逐级用空白基质溶液稀释成质量浓度为0.005mg/L、0.01mg/L、0.02mg/L、 选择与被测样品性质相同或相似的空白样品，按照8.1步骤进行前处理，得到空白基质溶液.精确定量离子的质量色谱图峰面积为纵坐标，相对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质 匹配标准工作曲线.
8.2.4定性及定量
8.2.4.1定性方法
（1）保留时间
被测试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在±2.5%之内.
（2）离子丰度比
在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物选择的子离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中 目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差符合表2规定，则可判断样品中存在目标农药.
表2定性时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度 > 50 % >20%至50% >10%至20% 10%允许相对偏差 ± 20 % ± 25 % ± 30 % ±50 %
注：本方法的标准物质多反应监测UPLC-MS/MS色谱图见附录C.
8.2.4.2定量方法
外标法定量.
