NY
中华人民共和国农业行业标准
食用菌菌种区别性鉴定 拮抗反应
Identification of distinctness for edible mushroom cultivar by antagonism
中华人民共和国农业部发布
前言
本标准的附录A为规范性附录，附录B为资料性附录.
本标准由中华人民共和国农业部提出并归口.
量监督检验测试中心. 本标准起草单位：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所、农业部微生物肥料和食用菌菌种质
本标准主要起草人：张金霞、陈强、黄晨阳、高巍、郑素月、张瑞颖、胡清秀.
食用菌菌种区别性鉴定拮抗反应
1范围
本标准规定了应用括抗反应进行食用菌菌种区别性鉴定的方法.
本标准适用于糙皮侧耳（Pleurotusostreatus）、白黄侧耳（Pleurotus cornucopiae）、肺形侧耳（Pleurotus pulmonarius）、佛州侧耳（Pleurotus ostreatus var.florida）、杏鲍菇（Pleurotus eryngi）、金顶例耳 （Plenrotus citrinopileatus）、猴头菇（Hericium erinaceus）、白灵菇（Pleurotus mebrodensis）、黑木耳（Aricularia auricula）、毛木耳（Auricularia polytricha）、茶树菇（Agrocybe cylindrica）、金针菇（Flamumulinavelutipes）、潜菇（Pholiotanameko）、否菇（Lentinulaedodes）、灰树花（Grifolafrondosa）、灵芝（Ganoderma spp.）、鸡腿菇（Coprinus atus）、黄伞（Pholiota adiposa）、斑玉草（Hypsizygusmarmoreus）等食用菌菌种区别性的鉴定，包括母种、原种和裁培种.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
NY/T1098-2006食用菌品种描述技术规范
3术语和定义
NY/T1098-2006确立的以及下列术语和定义适用于本标准.
3. 1
菌种区别性distinctness of spawn
供检菌种与对照菌种的不符合性.
3. 2
隆起型ridgy
拮抗反应的表现特征之一，表现为两菌株菌落交界处菌丝隆起.背面观察两菌株菌落交界处培养基中有或没有带状色素沉淀.
4原理
拮抗反应是某些真菌识别异已保持群体遗传多样性的反应，它是由基因组内异核体不亲和（heterokaryoninpatibility，het）位点控制的.当不亲和的菌株共同培养时，由于her位点的识别作用，菌株间就会产生拮抗反应，在交界处形成隆起、沟或隔离，从而防止遗传上明显不同的个体间菌丝的融合，以保持个体遗传上的独立和稳定.
5仪器设备
5.1高压灭菌锅.5.2净化工作台（接种箱）.5.3培养箱.5.4微生物学检测实验室其他常用设备.
NY/T1845-2010
6培养基
头用柠檬酸或食醋调至pH5.5.特殊种类需加人适量其生长所需特殊物质，如酵母粉、蛋白陈、麦芽汁、 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）或综合马铃薯萄糖琼脂培养基（CPDA）（见附录A.1、A.2）.麦芽糖等，但是不应过富.侧人培养显冷却成为平板.
7接种
7.1接种组合和重复
接种组合为3组.第一组：供检菌种与对照菌种，各接种1个接种块：第二组：供检菌种与供检菌种，各接种1个接种块；第三组：对照菌种与对照菌种，各接种1个接种块.每组3个重复.分别进行对崎培养.
7.2接种操作
严格按无菌操作，用5mm打孔器分别打取活化后适龄菌种菌落边缘作接种块，两接种块间隔30mm.分别置于距平板中心点的15mm处，菌丝朝上.
8培养条件
根据培养物的不同生长要求，给予其适宜的培养温度（多在22℃~28℃），通风、避光培养至接种块菌丝接触后，再在自然光下培养5d~7d.不同种类食用菌菌丝培养条件见附录B.
9拮抗反应的观察和判断
在灯下或自然光下，观察培养物表面两菌株菌落交界处菌丝是否呈现隆起型、沟型、隔离型反应.培养物表面菌丝有隆起型、沟型、隔离型三者之一的为有拮抗反应，供检菌种与对照菌种为不同品种；培 养物表面菌丝未呈现隆起型、沟型、隔离型三者之一的为无拮抗反应，但不能确定为相同品种.
附录A
A.1PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）
马铃薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，琼脂20g，水1000mL，pH自然.
A.2CPDA培养基（综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基）
然. 马铃薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，琼脂20g，水1000mL，pH自
