NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1857.2-2010
黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程 第2部分:黄瓜抗白粉病鉴定技术规程
Rulesfor evaluation of cucumber forresistance to diseasesPart 2:Rulefor evaluation of cucumber for resistance to powdery mildew
中华人民共和国农业部发布
前言
NY/T1857-2010《黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程》为系列标准,共8部分:
-第1部分:黄瓜抗霜霉病鉴定技术规程;一第2部分:黄瓜抗白粉病鉴定技术规程;一第4部分:黄瓜抗疫病鉴定技术规程; 第3部分:黄瓜抗枯萎病鉴定技术规程;第5部分:黄瓜抗黑星病鉴定技术规程;第6部分:黄瓜抗细菌性角斑病鉴定技术规程;-第7部分:黄瓜抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程; 第8部分:黄瓜抗南方根结线虫病鉴定技术规程.本部分为NY/T1857-2010的第2部分.本部分的附录A为资料性附录.本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口.本部分主要起草人:杨宇红、谢丙炎、冯兰香、杨翠荣、龚慧芝. 本部分起草单位:中国农业科学院蔬菜花卉研究所.
黄瓜主要病害抗病性鉴定技术规程 第2部分:黄瓜抗白粉病鉴定技术规程
1范围
查、抗病性评价和鉴定记载表格. 本部分规定了黄瓜抗白粉病鉴定的术语和定义、接种体制备、鉴定条件及试验设计、接种、病情调本部分适用于各种黄瓜资源对黄瓜白粉病抗性的室内鉴定及评价.
2术语和定义
下列术语和定义适用于本部分.
2. 1抗病性disease resistance植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状.
2.2抗病性鉴定identification of disease resistance 通过适宜技术方法鉴定植物对特定病害的抵抗水平.
2.3抗性评价evaluation ofresistancelevels根据采用的技术标准判别植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述.
2.4 致病性pathogenicity病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力.
2. 5人工接种artificial inoculation scale在适宜条件下,通过人工操作将接种体置于植物体适当部位并使之发病的过程.
2. 6病情级别disease rating人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述.
2. 7接种体inoculum 用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分.
2. 8接种悬浮液inoculumsuspension用于接种的含有定量接种体的液体.
2. 9 病情指数disease index(DI)通过对植物个体发病程度(病情级别)数值的计算所获得的群体发病程度的数值化描述形式.
2.10
NY/T 1857.2-2010
生理小种physiologicalrace
病原物种内在形态上无差异,但在不同种植物和品种上具有显著致病性差异的类群.
2. 11
鉴别寄主differential host
用于鉴定和区分特定病原物的生理小种/致病型/株系的一套带有不同抗性基因的寄主品种/品系或材料.
2. 12
黄瓜白粉病Cucumberpowderymildew
DC.了所引起的叶部产生白色粉斑,严重时白粉可覆盖枝蔓、叶柄且叶部布满白粉症状的黄瓜病害.其 由单囊壳白粉菌[Sphaerothecafuliginea(Schlecht)Poll和二孢白粉菌[Erysiphe cichoracearum中S.fuliginea为主要的黄瓜白粉病病原物.
3接种体制备
3.1病原物采集
采集具有典型白粉病病斑的黄瓜病叶,用毛刷刷取叶片上的孢子于盛有无菌水的烧杯中,获得分离物.分离物经形态学鉴定确认为Sphaerothecafuliginea(Schlecht)Poll.后,直接用于接种或扩繁备用.
3.2生理小种鉴定
不同基因型材料进行鉴定,具体方法见附录A的A.2. 对将用于抗性鉴定接种的分离物首先进行生理小种鉴定.生理小种鉴别寄主采用国际通用的甜瓜
3.3接种体繁殖与保存
3.3.1接种体繁殖
在接种前需要进行病原物接种体的繁殖.常用的繁殖方法为:在温室内将白粉病菌的分生孢子接1000μg/mL十二烷基硫酸钠(SDS),高速搅拌(1200r/min)3min~5min后即得孢子悬浮液,用血球 种在感病品种上繁殖.接种前用干净毛刷剧取叶片上长出的新鲜孢子于盛有无菌水的烧杯中,再滴加计数板计数分生孢子数稀释至接种浓度,为了不影响接种效果,白粉病菌孢子悬浮液放置时间最好不超过30min,因此从菌液制备到接种完成应限制在2h内.
3.3.2病原物保存
种幼苗,接种后将其置于温度20℃~25℃、湿度(RH)50%的培养室内,注意隔离保存. 活体植株保存法:选择易感白粉病的黄瓜或甜瓜品种,用喷雾接种法接种处于8~10叶期的感病品
离体子叶接种法:用接种针挑取白粉病菌的分生孢子,置于附在甘露糖醇一蔗糖培养基的消毒子叶上(子叶消毒方法:用0.05%的升汞溶液浸泡3min,然后用无菌水冲洗2~3次),置于17℃、有微弱光照的培养室内.用这种方法可保存白粉菌30d一45d.
4室内抗性鉴定
4.1鉴定室设置
人工接种鉴定室应具备人工调节温度、湿度及光照的条件,使人工接种后具备良好的发病环境.
鉴定时设“津研2号”黄瓜为抗病对照品种,“长春密刺”黄瓜为感病对照品种.
鉴定材料随机或顺序排列,每份材料重复3次,每重复10株苗.
2
鉴定材料种子经5%次氯酸钠溶液浸种10min后,用清水冲洗,放人垫有两层滤纸的培养Ⅲ中,然后于恒温培养箱中28℃催芽.待胚根长至0.5cm时,将其播于装有播种基质的塑料育苗内.育苗基质为草炭、蛭石和菜田土(2:1:1),基质经高温蒸汽灭菌(134℃,30min).在20℃~25℃的日光温室内育苗,幼苗应生长健壮、一致.
4.5接种
4.5.1接种期
黄瓜白粉病抗性鉴定接种期为1~2叶期.
4.5.2接种浓度
约5×10个孢子/mL.
4.5.3接种方法
接种采用喷雾接种法.用小型手持喷雾器将接种液均匀地喷于黄瓜叶片正、反两面至有水滴流出为止.
4.6接种后管理
接种后将植株置于鉴定室内黑暗保湿(RH为70%~80%)12h~16h,以后每天光照14h,不再保湿.接种期间温度控制在白天25℃~28℃,夜晚20℃~22℃C范围内.
5病情调查
5.1调查时间
病情调查于接种后10d~15d进行.
5.2调查方法
调查每份签定材料接种叶发病情况,根据病害症状描述,逐份材料进行调查,记载病情级别,计算出病情指数(DI).
病情指数按公式(1)计算:
DI = ∑(sxn) × 100NXS
式中:
DI-病情指数;各病情级别代表数值;”各病情级别病株(叶)数;N-调查总株(叶)数; S-最高病情级别代表值.
5.3病情分级
室内病情分级及其对应的症状描述见表1.
表1黄瓜白粉病病情级别划分
病情级别 症状描述0 无症状1 病斑面积占叶面积的1/3以下,白粉状病班模相不清3 2 病斑面积占叶面积的2/3以上,白粉状病班连片,叶片开始变黄 病班面积占叶面积的1/3~2/3.白粉状病斑较为明是,但分散不连片4 白粉层浓厚,由叶缘向里变褐5 叶片变福坏死班面积占叶面积的2/3以上,叶缘上卷