中华人民共和国国家标准
GB 31657.9-2025
食品安全国家标准 蜂产品中酞丁安残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
National food safety standardDetermination of ftibamzone residue in honey by liquidchromatography-tandemmass spectrometry method
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
食品安全国家标准 蜂产品中酞丁安残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件规定了蜂产品中配丁安残留量检测的制样和液相色谐-串联质谱测定方法. 本文件适用于蜂蜜中融丁安残留量的测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB/T6682分析实验室用水规则和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
蜂蜜中残留的药物用水提取，固相萃取柱净化，液相色谐-申联质谱法检测，外标法定量.
5试剂和材料
以下所用试剂，除特殊注明外均为分析纯试剂，水为符合GB/T6682中规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1甲醇（CHOH）：色谱纯.5.1.2甲酸（HCOOH）：色谱纯.5.1.3乙晴（CHCN)：色谱纯.5.1.4N.N-二甲基甲酰胺（CHNO DMF）：色诺纯. 5.1.5二氯甲烷（CHCl）.
5.2.1甲醇溶液：取甲醇10mL.用水稀释至100ml.5.2.2二氯甲烷-乙晴溶液：取二氯甲烷20mL，用乙晴稀释至100mL.
5.3标准品及其纯度
酞丁安(ftibamzone C H;N;O;S CAS号;210165-00-7)纯度≥95 %.
5.4标准溶液配制
5.4.1配丁安标准储备液：精密称取适量的酞丁安标准品，加人DMF0.5mL使其完全溶解，加入乙晴定容至10mL，配制成1000μg/mL的标准储备液，一18℃C以下避光保存，有效期1个月.
5.4.2酰丁安标准工作液：吸取配丁安标准储备液100pL，于10mL容量瓶中，用乙晴定容至刻度，配制成浓度为10μg/mL的酰丁安标准工作液，一18℃以下避光保存，有效期1个月.
5.2聚四氟乙烯滤膜：0.22μm.
GB 31657. 9-2025
6仪器和设备
6.2涡旋振荡器. 6.1液相色谱-申联质谱仪：配有电喷雾离子源.6.3高速离心机：8000r/min或以上.6.4水浴振荡器.6.5氮吹仪.6.6分析天平：感量0.01mg和0.01g.6. 7移液器;10 μL 20 ylL. 200 pl.、1 000 pl.、5 000 μl.6.8固相萃取装置，
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试蜂蜜，将其搅拌均匀，对有结晶的蜂蜜样品，在密闭情况下，置于不超过60C的水浴中解晶待样品全部融化后搅匀，冷却至室温.制备好的试样置于样品瓶中，密封，并做上标记.
a）取均质后的供试样品，作为供试试样；b）取均质后的空白样品，作为空白试样；
c）取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试样.
7.2试样的保存
蜂蜜样品于室温下避光保存.
8测定步骤
8.1提取
称取蜂蜜试料（5.0±0.05）g于50mL具塞塑料离心管中，加人10mL水，振荡5min，于4C下8 000r/min离心10min 上清液备用.
8.2净化
苯基固相萃取柱预先用10mL甲醇和10mL水活化，备用液以≤1滴/s流速过固相萃取柱，待完全流出后，用10mL甲醇水溶液淋洗，弃去全部流出液，负压抽干，10mL二氯甲烷-乙晴溶液洗脱，洗脱液收集于15mL离心管中，于40℃下氮吹至近干，准确加人1.0mL乙晴复溶，经0.22μm滤膜过滤后，供液相色谱-串联质谱测定.
8.3标准曲线的制备
准确移取酰丁安标准工作液适量，用乙晴溶液配制成浓度分别为5μg/L、10μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、500pg/L、1000μg/L的系列标准溶液，供液相色谱-串联质谱测定.以待测物的峰面积为纵坐标、相应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程和相关系数.
8.4测定
8.4.1液相色谱参考条件
a）色谱柱：C色谱柱（100mm×3.0mm，2.7μm）或相当者；b）流动相：A为0.1%甲酸水溶液，B为乙晴，梯度洗脱程序见表1；
表1梯度洗脱程序
时间min A B.%0 55 45100
