T/CITS 653-2025
Purity grading of protein reagents
中国检验检测学会 发布
目次
前言引言.. III1范围.2规范性引用文件3术语和定义4纯度等级及分级指标4.1纯度等级， 4.2分级指标和标准5试验方法，5.1杂蛋白含量.5.2形式正确的目标蛋白含量 5.3内毒素水平. 25.4微生物污染源，5.5宿主蛋白残留和酶残留5.6宿主DNA残留 金属元素（Ni）残留5.8乙睛残留， 5.75.9 蛋白A残留附录A（规范性） 高效尺寸排阻色谱-多角度静态光散射法（SEC-MALS法）A.1 原理A.2仪器设备. A.3 试剂.A.4分析条件，A.5操作步骤附录B（规范性） 仪器设备， 无菌检测方法.B.1 B.2 试剂耗材.B.3 阳性对照菌液B.4 物品传递规则 6B.5供试品检查， B.6阴性对照，B.7 阳性对照：B.8培养及结果观察B.9实验有效性判断 B.10实验结果判断.
前言
起草. 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由北京义翘神州科技股份有限公司提出.
本文件由中国检验检测学会归口.
本文件起草单位：北京义翘神州科技股份有限公司、北京索莱宝科技有限公司、喀斯玛（北京）科汉）生命科技有限责任公司、江苏凯基生物技术股份有限公司、上海银海圣生物科技有限公司. 技有限公司、上海碧云天生物技术有限公司、南开大学、北京百普赛斯生物科技股份有限公司、亲和（武
本文件主要起草人：陈宇宁、王旭曼、詹志强、马玉岭、王芳、李红林、李珊珊、张晓丹、陈幸苗、周浩、苗景赞、占园、禾立春、孙益军、江泉.
引言
测疾病标志物和开发靶向治疗策略的重要工具，也是生物医药研发的基石.蛋白试剂是通过提取或重组 蛋白是具有多种生物学功能（催化、免疫识别、信号传递等）的生物大分子，是生命科学研究、检表达的方法获得的可代表天然蛋白生物学性质的大分子试剂，在基础研究、临床诊断、药物开发和工业应用等方面发挥着关键作用，为科学研究和生物医药领域的创新提供了重要工具.现阶段，蛋白试剂主 要通过生物体组织提取或重组DNA技术由宿主细胞异源表达制备，并通过色谱层析技术纯化得到，蛋白试剂的质量控制（质控）涉及多个方面，包括稳定性、纯度、活性、污染控制和储存运输等，是确保其稳定性、重复性和可靠性的重要环节.由于蛋白试剂性质的多样性以及来源的复杂性，在生产、储存 和使用过程中，蛋白试剂的质控面临诸多挑战，需要通用性和代表性的质控标准来考核蛋白试剂的品质.
蛋白纯度（ProteinPurity）指的是蛋白试剂样品中目标蛋白的比例，即目标蛋白相对于总蛋白的含量.蛋白纯度对生命科学研究、生物技术和生物医药等领域至关重要，主要体现在（1）确保实验结果 的准确性：（2）保障生物制品的安全性和有效性：（3）提高结构研究的成功率和结构准确性：（4）保障工业和诊断应用的准确性等.在标定过程中，亦可反映出一些其他杂质（如核酸、内毒素、金属元素等）的含量，从面进一步明确蛋白试剂适合的使用场景.
目前行业中没有关于蛋白试剂纯度分级的统一标准，不同的供应商和实验室可能会使用不同的分级生产过程的标准化，确保不同批次的蛋白试剂具有一致的质量，减少批间差异，增强蛋白试剂的市场竞 争力，保障研究成果的准确性.在本文件的起草过程中，我们综合考虑了当前的科研需求、生产工艺、质量控制技术以及国际相关标准，确保标准的科学性、实用性和前瞻性.我们期望通过本文件的实施，能够为蛋白试剂的纯度评价提供明确指导，为生物医学的进步贡献力量.
蛋白试剂纯度分级
1范围
本文件界定了蛋白试剂的术语和定义，规定了蛋白试剂的纯度等级和分级指标，并描述了分级指标的试验方法.
本文件适用于研发和生产阶段的蛋白试剂的纯度分级.
本文件不适用于抗体药物或治疗用蛋白药物的纯度分级.
2规范性引用文件
仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，文件.
GB5009.268一2025食品安全国家标准食品中多元素的测定
《中华人民共和国药典》（2025版）
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
蛋白试剂proteinrcagents
通过应用重组表达技术制备或由天然体系经过提取和纯化等步骤制备的具有生物学活性的蛋白质.注：此类试剂可应用于生物药研发、细胞免疫治疗及诊断试剂的研发生产等，但不能直接应用于人体.
3.2
蛋白分子量molecular weight ofprotein
程中失去的水分子质量. 蛋白质是由氨基酸通过肽键连接形成的多肽链，其分子量是氨基酸质量的总和减去肽键形成过
注：蛋白质的分子量通常以道尔顿（Dalton，Da）或干道尔顿（kDa）为单位表示，参考《生物化学原理》，第园版，第三章.
3.3
蛋白形态protein formation
蛋白质在天然状态下的存在形式，蛋白的形态/结构决定蛋白的正确功能.
注：蛋白在天然状态下可以多种形式存在，如单体、同源二聚体、异源二聚体、三聚体和多聚体等.
3.4
杂蛋白protein contaminants
纯化后产品中除目标蛋白的其他蛋白.
3.5
纯度purity
蛋白试剂中具有正确分子量和/或正确形式的目标蛋白质的含量.注：主要反映了产品中目标蛋白与其他杂蛋白的相对量关系.根据检测方法，也可反映出产品中是否存在其他与蛋 白活性无关的杂质，如核酸、内毒素、金属元素等的残留水平.
4纯度等级及分级指标
4.1纯度等级
本文件中所涉及蛋白试剂的纯度按照具有正确形式的目标蛋白含量分为以下级别：a）初纯品：经过某种纯化方法从天然组织中提取或细胞培养体系中提纯，通过电泳法染色（如 考马斯亮蓝法染色或银染）鉴定，除目的蛋白条带以外，含有一定量杂质蛋白：
