ICS 13.080.01CCS B 11
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 4870-2025
土壤中磺胺类、喹诺酮类、四环素类、 大环内酯类和氯霉素类抗生素残留量 的测定液相色谱-质谱联用法
Determination ofsulfonamides quinolones tetracyclines macrolidesand chloramphenicols antibioties in soil-Liquid chromatography-tandemmass spectrometrymethod
中华人民共和国农业农村部 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部科学技术司提出.
本文件由农业农村部农业资源环境标准化技术委员会归口.
本文件起草单位：农业农村部环境保护科研监测所、中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所.
全乘风. 本文件主要起草人：孙宝利、贺泽英、陈永杏、陕红、邓凯、史小萌、张珊、黄金丽、封朝晖、何沛侨、赤杰、
土壤中磺胺类、喹诺酮类、四环素类、大环内酯类和 氯霉素类抗生素残留量的测定液相色谱-质谱联用法
1范围
本文件规定了土壤中磺胺类、喹诺酮类、四环素类、大环内酯类和氯霉素类共54种抗生素（见附录A）
残留量的液相色谱-质谱联用测定方法.
本文件适用于土壤中54种抗生素残留量的测定.
2规范性引用文件
该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法NY/T52土壤水分测定法NY/T395农田土壤环境质量监测技术规范
3原理
试样中的抗生素用乙和磷酸盐缓冲液混合溶液提取，提取液经分离、分散固相萃取净化和旋转蒸发浓缩，液相色谱-质谱联用仪检测，外标法定量.
4试剂和材料
除非另有说明，在分析中仅使用分析纯的试剂，水为GB/T6682规定的一级水.
4.1试剂
4.1.1乙晴（CH CN.CAS号：75-05-8).4.1.2甲醇（CHO，CAS号：67-56-1）：色诺纯.4.1.3甲酸（CHO，CAS号：64-18-6). 4.1.4磷酸（H PO CAS号：7664-38-2）4.1.5磷酸二氢钾（KHPO ，CAS号：7778-77-0).4.1.6乙二胺四乙酸二钠二水合物（CHNNaO2HO，CAS号：6381-92-6）.4.1.7无水硫酸镁（MgSO，CAS号：7487-88-9).4.1.8氯化钠（NaCI CAS号：7647-14-5).4.1.9氨-甲醇溶液（NH，CAS号：7664-41-7）：7mol/L.
4.2.1磷酸盐缓冲溶液：称取27.2g磷酸二氢钾用水溶解，加人1.35mL磷酸混匀，用水稀释至1L. 4.2.2乙晴-甲酸溶液（955）：量取50mL甲酸加人950mL乙晴中.混匀.4.2.3甲酸-水溶液（199）；量取1mL甲酸加入99mL水中，混匀，4.2.4甲醇-甲酸水溶液（5050）：量取50mL甲醇加人50mL甲酸-水溶液（4.2.3），混匀.
54种抗生素标准品，见附录A，纯度≥95%.
4.4标准溶液配制
4.4.1标准储备溶液：磺胺唑嗯琳、诺氟沙星、氟罗沙星、西诺沙星、吡哌酸、环丙沙星、洛美沙星、奥比沙
NY/T 4870-2025
星题喹酸和泰乐菌素分别准确称取标准品约10mg（精确至0.1mg）于烧杯中，用甲醇溶解后转移至100ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混匀，配制成质量浓度为100mg/L的标准储备溶液：其他抗生素，定容至刻度，混匀，配制成质量浓度为1000mg/L的标准储备溶液.避光一20℃C及以下条件保存，有效 分别准确称取标准品约10mg（精确至0.1mg）于烧杯中，用甲醇溶解后转移至10mL容量瓶中，用甲醇期6个月.
4.4.2混合标准储备溶液（20mg/L)：吸取一定量的农药标准储备溶液于容量瓶中.用甲醇定容至刻度，避光一20℃及以下条件保存，有效期3个月.
4.4.3混合标准溶液（5mg/L）：吸取一定量混合标准储备溶液于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，避光一20℃及以下条件保存，有效期1个月.
4.5材料
4.5.1陶瓷均质子：2cm（长）×1cm（外径），或相当者.4.5.2八烷基硅烷键合硅胶（Cs）：粒径40μm~60pum.4.5.3乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）：40μm~60cm4.5.4微孔滤膜（有机相）；13mm×0.22μm，或相当者.
5仪器设备
5.1液相色谱-三重四极杆质谱联用仪：配有电喷雾离子源（ESI）.5.2旋转蒸发仪：可控温.5.3分析天平：感量0.1mg和0.01g.5.4涡旋混合仪.5.5离心机；转速不低于4000r/min.
6试样制备
按照NY/T395的要求采集新鲜土壤样品，去除石子、植物根茎等杂质后混合均匀，不风干，放人聚乙烯瓶或袋中.将样品按照测试和备用分别存放，于一20℃及以下条件保存，按照NY/T52测定样品含水量.
7测定步骤
7.1前处理
称取2g试样（精确至0.01g）于50mL塑料离心管中，加人0.4g乙二胺四乙酸二钠二水合物（4.1.6）、1题陶瓷均质子，然后加人10mL磷酸缓冲溶液（4.2.1）和10mL乙晴-甲酸溶液（4.2.2）.涡旋振荡提取3min，4000r/min离心5min，将上清液全部转移至50mL塑料离心管中，再加入10mL磷酸盐缓冲溶液（4.2.1）和10ml乙晴-甲酸溶液（4.2.2）重复提取1次，合并上清液.向合并的提取液中加人 10g氯化钠，剧烈振荡30s后4000r/min离心5min，吸取8mL上清液至内含1200mg无水硫酸镁、200mgC200mgPSA的15mL塑料离心管中，涡旋混匀1min.4000r/min离心5min准确吸取5蒸发至近干.加入1m1甲醇-甲酸水溶液（4.2.4）复溶，过微孔滤膜，用于测定.
注：测定四环索类抗生素（金霉素、土霉素、四环素、多西环素）和螺旋霉索时，净化材料中不使用PSA.
7.2测定
7.2.1仪器参考条件
7.2.1.1液相色谱参考条件
a）色谱柱：C[2.1mm（内径）×100mm，1.8pm]，或相当者；b）流动相：A相为0.1%甲酸水溶液，B相为甲醇.流动相梯度条件见表1；
