中华人民共和国国家标准
GB 5413.36-2026
食品安全国家标准
中华人民共和国国家卫生健康委员会 国家市场监督管理总局 发布
前言
本标准代替GB5413.36-2010《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中反式脂肪酸的测定》和GB5009.168-2016（食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定》中特殊膳食用食品脂肪酸的测定.
本标准与GB5413.36-2010相比，主要变化如下：
一标准名称修改为（食品安全国家标准特殊膳食用食品中脂肪酸和反式脂肪酸的测定》：修改了适用范围；一增加了反式脂肪酸的种类；增加了乙酰氯-甲醇法及甲醇钠法：增加了内标定量方式.
食品安全国家标准
特殊膳食用食品中脂肪酸和反式 脂肪酸的测定
1范围
本标准规定了特殊膳食用食品中脂肪酸和反式脂肪酸的测定方法.第一法氢氧化钾-甲醇法适用于特殊膳食用食品中脂肪酸和反式脂肪酸的测定.第二法乙酰氯-甲醇法适用于含水量小于5%的特殊膳食用食品中脂肪酸和反式脂肪酸的测定.第三法甲醇钠法适用于脂肪含量大于1.5%的要幼儿配方食品中脂肪酸和反式脂肪酸的测定.
第一法氢氧化钾-甲醇法
2原理
试样中的脂肪经溶剂提取后，提取物在碱性条件下与甲醇发生反应生成脂肪酸甲酯，经气相色谱仪分析，内标法或外标法定量，
3试剂和材料
除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水.
3.1试剂
3.1.1氢氧化钾（KOH）：≥85%.3.1.2甲醇（CHO）：色谱纯.3.1.3碘（1）.3.1.4碘化钾（K1）. 3.1.5 刚果红(C H:N NaO S;).3.1.6盐酸（HC1）.3.1.7正已烷（CH）：色谱纯.3.1.8甲苯（CH）：色谱纯.3.1.9α-淀粉酶：酶活力≥1.5U/mg. 3.1.10氨水（NHHO):25%~28%.3.1.11乙醇(CH O):≥95%.3.1.12石油醚（C H）:沸程30℃~60℃3.1.13乙醚(C HO).3.1.15无水硫酸钠（Na;SO ）. 3.1.14硫酸氢钠（NaHSO）.
3.2试剂配制
3.2.1氢氧化钾甲醇溶液（4mol/L)：称取26.4g氢氧化钾，用约80mL甲醇溶解，冷却至室温，用甲醇定容至100mL，加人约5g无水硫酸钠，充分搅拌后过滤，保留滤液.3.2.2碘溶液（0.1mol/L）：称取12.7g碾和25g碘化钾，用水溶解并定容至1000mL. 3.2.3刚果红溶液（10g/L）：称取1g刚果红，用水溶解并定容至100mL.3.2.4盐酸溶液（8.3mol/L）：量取347mL盐酸，用水定容至500mL，混匀.3.2.5乙醚-石油醚等量混合液：取等体积的乙醚和石油醚混匀.注：刚果红溶液可使溶剂和水相界面清晰，可选择性使用、也可使用其他能使水相染色面不影响测定结果的溶液.
3.3标准品
3.3.1单一脂肪酸甲酯标准品：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准品.常见脂肪酸甲酯标准品见附录A3.3.2单一脂肪酸甘油三酯标准品：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准品.常见 脂肪酸甘油三酯标准品见附录A.3.3.3混合脂肪酸甲酯标准品：经国家认证并授予标准物质证书的标准品.常见脂肪酸甲酯标准品见附录A.3.3.4混合脂肪酸甘油三酯标准品：经国家认证并授予标准物质证书的标准品.常见脂肪酸甘油三酯 标准品见附录A.3.3.5十一碳酸甘油三酯（CHO，CAS号：13552-80-2）：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准品.
3.4标准溶液
3.4.1单一脂肪酸甲酯标准储备液（10.00mg/mL）
根据目标脂肪酸分别选择单一脂肪酸甲酯标准品配制不同脂肪酸甲酯的单标溶液，用正已烷稀释定容，于一18℃及以下温度冰箱中保存，有效期6个月.
3.4.2单一胆肪酸甘油三酯标准储备液（50.00mg/mlL）
溶解，必要时超声，定容，于一18℃及以下温度冰箱中保存，有效期6个月， 根据试样中所要分析脂肪酸的种类选择相应甘油三酯标准品，称取适量（精确至0.1mg），用甲苯
3.4.3十一碳酸甘油三酯内标溶液（5.00mg/mL）
后用甲醇定容，于一18℃及以下温度冰箱中保存，有效期6个月. 准确称取2.5g（精确至0.1mg）十一碳酸甘油三酯至烧杯中，加入甲醇溶解，移入500mL容量瓶
3.4.4混合脂肪酸甲酯标准工作溶液
根据目标脂肪酸将单一脂肪酸甲酯标准储备液（10.00mg/mL）进行混合配制或者采用符合要求的5.00mg/mL，于一18℃及以下温度冰箱中保存，有效期3个月. 混合脂肪酸甲酯标准品进行配制使用正己烷定容，其中每种成分的质量浓度为0.0500mg/mL~
3.4.5混合脂肪酸甲酯标准系列工作溶液
00由00 根据目标脂肪酸分别准确移取单一脂肪酸甲酯标准储备液（10.00mg/mL)10.0pL、20.0gL50.0gl、2
使用正已烷定容，配制成质量浓度为0.0500mg/mL、0.100mg/mL、0.250mg/mL、1.00mg/mL、2.50mg/mL、5.00mg/mL的混合脂肪酸甲酯标准系列工作溶液（可根据样品含量适当调整工作液浓度），其中十一碳酸甲酯的质量浓度为1.00mg/mL，于一18C及以下温度冰箱中保存，有效期3个月.
3.4.6混合脂肪酸甘油三酯标准系列工作溶液
根据试样中所要分析脂肪酸的种类和含量，分别准确量取单一脂肪酸甘油三酯标准储备液（50.00mg/mL>10.0μL、20 0pL、50.0μL、200μL、500μL、1000pL于5mL容量瓶中 使用甲苯定容 配制成质量浓度为 0.100 mg/mL 0.200mg/mL 0.500 mg/mL 2.00 mg/mL 5.00 mg/mL 10.0 mg/mL的混合脂肪酸甘油三酯标准系列工作溶液（可根据样品含量适当调整工作液浓度），于一18C及以下温度冰箱中保存，有效期3个月.
注：加标试验时应先将标准溶液加人到称样容器中，氮吹干溶测后称样其余按5.2步骤进行前处理.
4仪器和设备
4.1分析天平：感量0.1mg和1mg.4.2匀浆机或实验室用组织粉碎机或研磨机.4.3恒温水浴锅：控温范围40℃C~100℃，控温土1℃.4.4毛氏抽脂瓶.4.5毛氏离心机.4.7氮吹仪.4.8旋转蒸发仪.4.9涡旋振荡器.4.10气相色谱仪：具有氢火焰离子化检测器（FID）.
4.6离心机;转速≥5 000r/min
5分析步骤
5.1试样的制备
均匀液体样品、粉状固体样品直接摇匀后备用；非均匀液体样品、半固体样品用匀浆机打成匀浆后或研磨机粉碎混匀后备用. 备用：乳酪等半固体样品可适当加热熔融，并趁热充分搅拌均匀后备用：其他固体样品使用组织粉碎机
5.2试样的处理
5.2.1试样的预处理
含淀粉的试样：称取混合均匀的固体试样约1.5g，液体试样约5g（精确至0.001g，可根据样品脂肪含量适当调整称样量，含脂肪100mg~200mg）于毛氏抽脂瓶或具塞量筒中（如采用内标法，则准确匀后，加人8mL~10mL温水（40C~45C），摇匀-盖上瓶盖置于55C±2C水浴2h，每隔10min振摇一次.加人两滴0.1mol/L的碘溶液，检验淀粉是否水解完全.若无蓝色出现，则水解完全，否则将毛氏抽脂瓶或具塞量筒重新置于水浴中，直至蓝色消失，取出冷却至室温.
脂肪含量适当调整称样量，含脂肪100mg~200mg）于毛氏抽脂瓶或具塞量筒中（如采用内标法，则准 不含淀粉的试样：称取混合均匀的固体试样约1.5g，液体试样约10g（精确至0.001g，可根据样品
