中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.28-2001代替GB/T 14926.281994

实验动物 小鼠细小病毒检测方法

Laboratory animal-Method for examination ofminute virusofmice(MVM)

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前 言

改动，仅对原标准的个别文字作了修改. 本标准是对GB/T14926.28-1994（实验动物小鼠细小病毒检验方法》的修订.对检测方法未作

本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.

本标准起草单位：中国实验动物学会.

本标准主要起草人：届霞琴.

本标准于1994年1月首次发布.

中华人民共和国国家标准

实验动物 小鼠细小病毒检测方法

GB/T 14926-28-2001代费 GB/T 14926. 28-1994

Laboratory animalMethod for examination ofminute virus of mice (MVM)

1范园

本标准规定了小鼠细小病毒（MVM）的检测方法和试剂等.

本标准适用于小鼠MVM的检测.

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用面构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.

GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验 GB/T14926.51-2001实验动物免疫酶试验GB/T14926.52-2001实验动物免疫荧光试验

3原理

根据免疫学原理，采用MVM抗原检测小鼠血清中MVM抗体.

4主要试剂和器材

4.1试剂：

MVM接种小鼠胚（ME）或3T3细胞，加维持液培养7~10d.当细胞病变达~时收获.冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原.

4.1.1.2正常抗原

ME或3T3细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片而获得的上清波.

4.1.2抗原片

MVM接种大鼠胚（RE）或ME细胞培养7~10d，病变达~时用胰酶消化分散.PBS洗涤，涂片.室温干燥后，冷丙酮固定10min，一20C保存.

4.1.3阳性血清

MVM抗原免疫SPF小鼠所获得的抗血清.

中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.27-2001代替GB/T 14926.271994

实验动物 小鼠腺病毒检测方法

Laboratory animal-Method for examination ofmouse adenovirus (MAd)

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前 旱

本标准是对GB/T14926.27-1994《实验动物小鼠腺病毒检验方法》的修订.对检测方法未作改动，仅对原标准的个别文字作了修改，

本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口，

本标准起草单位：中国实验动物学会.

本标准主要起草人：届霞琴.

本标准于1994年1月首次发布.

中华人民共和国国家标准

实验动物 小鼠腺病毒检测方法

GB/T 14926. 27-2001代巷 GB/T 14926. 27-1994

Laboratory animal-Method for examination ofmouse adenovirus (MAd)

1范围

本标准现定了小鼠腺病毒（MAd）的检测方法和试剂等.本标准适用于小鼠MAd的检测.

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用面构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.

GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.51-2001实验动物免疫酶试验 GB/T14926.52一2001实验动物免疫荧光试验

3原理

根据免疫学原理，采用MAd抗原检测小鼠血清中MAd抗体.

4主要试剂和器材

4.1试剂

4.1.1.1特异性抗原

十十十时收获.冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成 MAd接种小鼠胚（ME）或小鼠肾（MK）或3T3细胞.加维持液培养4~5d.当细胞病变达十~EL.ISA抗原.

4.1.1.2正常抗原

ME或MK或3T3细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片面获得的上清液.

4.1.2抗原片

MAd感染细胞，培券3~5d.病变达~时用胰酶消化分散.PBS洗涤，涂片.室温干燥后，冷丙酮固定10min，-20C保存，

4.1.3阳性血清

MAd抗原免疫SPF小鼠所获得的抗血清.

中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.26-2001代替GB/T 14926.26-1994

实验动物 小鼠脑脊髓炎病毒检测方法

Laboratory animalMethod for examination ofTheiler's mouse encephalomyelitis virus (TEMV)

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前 旱

未作改动，仅对原标准的个别文字作了修改. 本标准是对GB/T14926.26-1994（实验动物小鼠脑脊髓炎病毒检验方法3的修订.对检测方法

本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.

本标准主要起草人：届霞琴.

本标准于1994年1月首次发布，

中华人民共和国国家标准

实验动物 小鼠脑脊髓炎病毒检测方法

GB/T 14926.26-2001代替GB/T 14926.25-1994

Laboratory animal-Method for examination ofTheiler's mouse encephalomyelitis virus (TMEV)

1范围

本标准规定了小鼠脑脊髓炎病毒（TMEV）的检测方法、试剂等.本标准适用于小鼠TMEV的检测.

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.

GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.52-2001实验动物免疫荧光试验 GB/T14926.51-2001实验动物免疫酶试验GB/T14926.54-2001实验动物血凝抑制试验

3原理

下，能集人“O”型红细胞，这种凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制的原理，检测小鼠血清中 根据免疫学原理，采用TMEV抗原检测小鼠血清中TMEV抗体：或根据TMEV在一定的条件TMEV抗体.

4主要试剂和器材

4.1试剂 4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原

TMEV（GD株）感染小鼠，待发病后取脑，研磨，制成10%悬液，3000r/min离心10min后取上冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原.

BHK21细胞冻融破碎后经低速离心去除细胞碎片面获得的上清液.

4.1.2抗原片

TMEV（GDV株）感染BHK21细胞，培养4~5d，病变达十~十十时，将细脑用胰酶分散，用PBS洗涤，滴片.室温干燥后，冷丙酮固定10min，一20C保存.

中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.25-2001代替GB/T 14926.251994

实验动物 呼肠弧病毒Ⅲ型检测方法

Laboratory animalMethod for examination ofreovirus3（Reo3)

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前 旱

本标准是对GB/T14926.25-1994（实验动物呼肠孤病毒I型检验方法）的修订，对检测方法未作改动，仅对原标准的个别文字作了修改.

本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.

本标准起草单位：中国实验动物学会.

本标准主要起草人：屈霞琴.

本标准于1994年1月首次发布.

中华人民共和国国家标准

实验动物 呼肠孤病毒Ⅱ型检测方法

GB/T 14926.252001代带 GB/T 14926.25-1994

Laboratory animalMethod for examination ofreovirus 3 (Reo3)

1范围

本标准规定了呼肠孤病毒Ⅱ型（Rco3）的检测方法、试剂等.本标准适用于小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠Reo3的检测.

2引1用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用面构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.

GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.51-2001实验动物免疫酶试验 GB/T14926.52-2001实验动物免疫荧光试验

3原理

根据免疫学原理，采用Reo3抗原检测小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠血清中Reo3抗体.

4主要试剂和器材

4.1试剂：4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原

处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原， Rco3感染BSC-1或BHK21细胞，当病变达~时，收获培养物.冻融三次或超声波

4.1.1.2正常抗源

BSC-1或BHK21细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液.

4-1.2抗原片

温干燥的同时，在紫外线下20cm处照30min.冷丙酮固定10min，一20C保存， Rco3感染BHK21细胞，培养4~5d，病变达~时用胰酶消化分散，PBS洗涤，涂片.室

4.1.3阳性血清

Rco3抗原免疫清洁或SPF小鼠、大鼠、原鼠、地鼠所获得的抗血清.

4.1.4阴性血清

中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.24-2001代替GB/T 14926.24-1994

实验动物 小鼠肺炎病毒检测方法

Laboratory animal-Method for examination ofpneumonia virus of mice（PVM）

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前 旱

试验检测方法，对个别文字作了修改. 本标准是对GB/T14926.24-1994（实验动物小鼠肺炎病毒检验方法3的修订.删除了血凝抑制

本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.

本标准起草单位：中国实验动物学会，

本标准主要起草人：屈霞琴.

本标准于1994年1月首次发布.

中华人民共和国国家标准

实验动物 小鼠肺炎病毒检测方法

GB/T 14926-24-2001代带 GB/T 14926.24-1994

Laboratory animalMethod for examination of pneumonia virus of mice (PVM)

1范围

本标准规定了小鼠肺炎病毒（PVM）的检测方法、试剂等.本标准适用于小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠PVM的检测.

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用面构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.

GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验 GB/T14926.51-2001实验动物免疫试验GB/T14926.52-2001实验动物免疫荧光试验

3原理

根据免疫学原理，采用PVM抗原检渊小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠血清中PVM抗体.

4主要试剂和器材

4.1试剂：4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原

PVM感染小鼠待发病后取肺脏，研磨，制成10%悬液，3000r/min离心10min后取上清波感染BHK21细胞，吸附1.5~2h，加维持液培养10~14d.当细胞病变达时收获.冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原，

4.1.1.2正常抗原

4.1.2抗原片

PVM感染BHK21细胞，培养5~7d，病变达~时，将细胞用胰酶消化分散，PBS洗涤，除片.室湿干燥后，冷内酮固定10min，一20C保存.

4.1.3阳性血清

PVM免疫清洁或SPF小鼠、大鼠、原鼠、地鼠所获得的抗血清.

GB/T 14926.21-2008
前言
GB/T14926《实验动物》共54个部分，为不同微生物和病毒检测技术方法。

本部分自实施之日起代替GB/T14926.21-2001《实验动物兔出血症病毒检测方法》。

本部分与GB/T14926.21-2001相比主要技术差异如下： a）增加兔出血症病毒核酸（RHDV）核酸检测方法； b）确定免免疫接种RHDV疫苗后的血清抗体合格判定标准。

本部分由全国实验动物标准化委员会提出并归口。

本部分起草单位：全国实验动物标准化技术委员会。

本部分主要起草人：贺争鸣、付瑞、田克恭。

本部分所代替标准的历次版本发布情况为： GB/T 14926. 211994,GB/T 14926. 21-2001。

GB/T 14926.21-2008
实验动物免出血症病毒检测方法
1范围 GB/T14926的本部分规定了兔出血症病毒（RHDV）的检测方法。

本部分适用于兔RHDV抗原、抗体和病毒核酸的检测。

2规范性引用文件 下列文件中的条款通过GB/T14926的本部分的引用而成为本部分的条款。

凡是注日期的引用文 件，其随后的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分， GB/T14926.53实验动物血凝试验 GB/T14926.54实验动物血凝抑制试验 3原理 血凝试验（HA）：在一定条件下，RHDV能凝集人“O”型红细胞，产生可见的凝集反应。

根据这一 特性检测兔肝组织中有无RHDV抗原。

血凝抑制试验（HAI）：在一定条件下，RHDV凝集人"O"型红细胞的能力可被特异性抗体所抑制。

根据这一特性检测免血清中有无RHDV抗体。

核酸检测：根据RHDVVP60基因序列保守的特点，设计特异引物，扩增目的片段，检测兔组织中 的 RHDV 核酸。

4主要试剂与器材 4.1试剂 4.1.1血凝素 人工感染或自然发病的兔肝组织，经研磨制成10%悬液，3000r/min离心10min而获得的上 清液。

4.1.2阳性血清 RHDV抗原免疫或RHDV自然感染恢复后的兔血清。

4.1.3阴性血清 无RHDV感染、未经免疫的兔血清。

4.1.4人"0"型红细胞. 4.1.5缓冲液与溶液 4. 1. 5. 1PBS(pH7. 4) NaC18g KC10.2 g NaHPO, 12HO2.83 g KH;PO,0.2 g 去离子水1 000 mL 4. 1. 5. 2TRIzol Reagent,
GB/T 14926.21-2008 4. 1. 5. 3 50 × TAE Buffer(pH8. 5) Tris242 g 醋酸57.1 mL Na;EDTA • 2HO37.2 g 去离子水1 000 mL 4.1.5.4澳乙锭（10 mg/ml). 4. 1. 5.5 6×Loding Buffer。

4.1.5.6氨苄青霉素（100mg/mL). 4.1.5.7三氯甲烷（分析纯）. 4.1.5.8乙醇（分析纯）. 4.1.5.9异丙醇（分析纯）。

4.1.6酶与缓冲液 4. 1. 6. 15 × AMV RT Buffer AMV RTase(10 U/μL). 4. 1. 6. 2 RNase inhibitor(40 U/μL) 。

4.1.6.3 DEPC-HO 4. 1. 6. 4随机弓1物 9mers(500 μg/mL)。

4. 1. 6. 5 dNTP mixture(2. 5 mmol/ L each), 4. 1. 6. 6 MgCl, (25 mmol/L) ,10× PCR Buffer,Taq DNA polymerase(5 U/yL) , 4.1.7培养基 4.1.7.1LB培养基 tryptone10 g yeast extract5g NaCI10 g 去离子水1 000 mL 4.1.7.2 LB/Amp tryptone10 g yeast extract5g NaC110 g
100 μg/mL 去离子水1 000 mL 4.1.8琼脂糖凝胶Agarose L03. 4.1.9感受态细胞与载体 4.1.9.1适用于所构建克隆载体的大肠杆菌感受态细胞。

4.1.9.2DNA片段琼脂糖凝胶纯化试剂盒。

4.1.9.3可用于连接PCR产物的商品化T载体。

4.1.9.4质粒小量提取试剂盒。

4.2器材 4.2.1微量振荡器。

4.2.2微量血凝反应板（U型或V型）。

4.2.3微量加样器(容量 0.5pL~10μL,10μL~100xL,20xL~200pL，100pL~1 000xL)。

4.2.4生物安全柜。

4.2.5冷冻离心机 4.2.6紫外分光光度仪。

2
GB/T 14926.21-2008 4.2.7PCR仪. 4.2.8电泳仪。

4.2.9紫外透射仪。

4.2.10恒温培养箱。

4.2.11恒温摇床。

4.2.12恒温水浴箱。

4.2.13超纯水系统. 4.2.14冰箱。

5操作步骤 5.1采用HA方法（见GB/T14926.53）进行病毒抗原检测。

5.2采用HA1方法（见GB/T14926.54）进行病毒抗体检测。

5.3病毒核酸检测 5.3.1引物设计 根据RHDV FDR株序列（GenBank登录号：NC_001543），针对VP60基因区段设计引物。

引物在 RHDV基因组中的位置、核苷酸组成及预期扩增目的基因长度见表1。

表1RT-PCR引物 引物位置序列产物大小 正向引物P1nt 6254- nt 62715′-ATGCCAATGCTGGGTCTG-3′368bp 反向引物 P2nt 6621- nt 66025'-TTGAGGCGTGTATGTGATGG-3' 5.3.2RNA提取 5.3.2.1在生物安全柜内，取RHDV感染的兔肝组织50mg~100mg，置于灭菌玻璃研磨器中，加 1mL灭菌PBS（pH7.4）充分研磨。

5.3.2.2将肝组织匀浆转移至1.5mL洁净离心管中，加入1mlTRlzolReagent，混匀.室温放置 10 min. 5.3.2.3加0.2mL三氯甲烷，充分混匀10s,室温放置10min.4C12000r/min离心15min 5.3.2.4取上清，加等体积异丙醇，室温20min，4C12 000r/min离心15min. 5.3.2.5弃上清，沉淀以1mL75%乙醇（现用现配）洗涤后，室温干燥至RNA呈透明膜状。

5.3.2.6加40LDEPC-HO溶解RNA（沉淀），紫外分光光度仪测定所提取的RNA，立即进行反转 录（RT）或-70C保存。

警告：DEPC对眼睛和气道粘膜有强刺激，在操作中应在通风条件下进行，使用时戴口罩，不小心沾 到手上应立即冲洗。

5.3.3反转录（RT） 5.3.3.1RT反应体系为25L，依次加人如下成分：5yL5×AMV RT Buffer，5pL dNTP mixture (2. 5 mmol/ L each) ,1 μL 机引物)(500 μg/mL),0. 5 μL RNase inhibitor(40 U/μL) 12. 5 μL RNA 模版1 μL AMV RTase(10 U/μL), 5.3.3.2反转录反应条件为：37C90min，95C5min，所得cDNA可用作PCR反应模板。

5.3.3.3每次进行RT时均设标准阳性、阴性及空白对照。

5.3.4 RT-PCR 2 L dNTP mixture,1 μL 正向引物 P1(50 pmol/L), 1 μL 反向引物 P2(50 pmol/L)，2 yLcDNA, 0. 5 μL Tαq DNA polymerase(5 U/μL) ,36. 5 μL ddH; O....

中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.23-2001代替GB/T 14926.23-1994

实验动物 仙台病毒检测方法

Laboratory animal-Method for examination ofSendai virus (SV)

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前 昊

的免疫荧光试验方法. 本标准是对GB/T14926.23-1994《实验动物仙台病毒检验方法》的修订.增加了检测病毒抗体

本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.

本标准起草单位：中国实验动物学会.

本标准主要起草人：贺争鸣.

本标准于1994年1月首次发布.

中华人民共和国国家标准

实验动物 仙台病毒检测方法

GB/T 14926. 23-2001代格GB/T 14926.23-1994

Laboratory animalMethod for examination ofSendal virus (SV)

1范围

本标准规定了仙台病毒（SV）的检测方法、试剂等.

本标准适用于小鼠、大鼠、聚鼠、地鼠、兔仙台病毒的检测.

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用面构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性，

GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.51-2001实验动物免疫酵试验GB/T14926.52一2001实验动物免疫荧光试验 GB/T14926.54-2001实验动物血凝抑制试验

3原理

根据免疫学原理，采用SV抗原检测小鼠、大鼠、脉鼠、地鼠、兔血清中仙台病毒抗体：或根据SV在鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、免血清中仙台病毒抗体. 一定的条件下，能凝集鸡、豚鼠红细胞，这种凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制的原理，检测小

4主要试剂和器材

4.1试剂：4.1.1ELISA 抗原4.1.1.1特异性抗原

用SV感染9d龄SPF鸡胚尿囊腔，培养于36C温箱，72h后收冻于4C，次日无菌收取尿囊液，4C2000r/min离心10min，用0.5%鸡或豚鼠红细胞和SV阳性血清做血凝和血凝抑制试验，验证其病毒特异性和血凝效价，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原.

4.1.1.2正常抗原

9d龄SPF鸡胚尿囊液.

4.1.2抗原片

SV感染BHK21细胞，接种后2~3d，病变达十十～十十时用胰酶消化分散，PBS洗涤，涂片.室温干燥后，冷丙酮固定10min，一20C保存.

中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.22-2001代替GB/T 14926.22-1994

实验动物 小鼠肝炎病毒检测方法

Laboratory animalMethod for examination ofmouse hepatitis virus (MHV)

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前

试验方法.对GB/T14926.22-1994中的个别文字做了修改， 本标准是对GB/T14926.22-1994（实验动物小鼠肝炎病毒检验方法）的修订.增加了免疫荧光

本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.本标准起草单位：中国实验动物学会.本标准主要起草人：屈霞琴.

本标准于1994年1月首次发布.

中华人民共和国国家标准

实验动物 小鼠肝炎病毒检测方法

GB/T 14926-22-2001代特 GB/T 14926- 22-1994

Laboratory animalMethod for examination ofmouse hepatitis virus (MHV)

1范围

本标准规定了小鼠肝炎病毒（MHV）的检测方法、试剂等.本标准适用于小鼠MHV的检测.

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用面构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.

GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.51-2001实验动物免疫酶试验 GB/T14926.52-2001实验动物免疫荧光试验

3原理

根据免疫学原理，采用MHV抗原检测小鼠血清中MHV抗体.

4主要试剂和器材

4.1试剂：4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原

MHV（包括MHVMHVMHV-A、MHV-JHM四个毒株）感染DBT或L929细胞，接种后2~4d，病变达十十十~十十时收获.冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经 超速离心浓缩后制成ELISA抗原.

4.1.1.2正常抗原

DBT或L929细胞冻融破碎后经低速离心去除细胞碎片面获得的上清液.

4.1.2抗原片

MHV感染DBT或L929细胞接种后1~2d，病变达~时用胰酶消化分散，PBS洗涤，涂片.室温干燥后，冷丙酮固定10min，一20C保存.

4.1.3阳性血清

MHV抗原免疫清洁或SPF小鼠所获得的抗血清.

中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.20-2001代替GB/T 14926.20-1994

实验动物 鼠痘病毒检测方法

Laboratory animal-Method for examination ofEctromelia virus (Ect..)

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前 言

验动物脱脚病病毒（鼠痘病毒）检测方法"改称为“实验动物鼠痘病毒检测方法”为提高检测方法的 本标准是对GB/T14926.20-1994（实验动物脱脚病病毒（鼠痘病毒）检测方法》的修订，将“实敏感性，弃用痘苗病毒作为鼠痘病毒抗体检测用的著代抗原.删除了GB/T14926.20-1994中5.2所规定的病毒检测有关内容，增加了免疫酶组织化学法作为病毒抗原的检测方法，

本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.本标准起草单位：中国实验动物学会.本标准主要起草人：贺争鸣.

本标准于1994年1月首次发布.

中华人民共和国国家标准

实验动物 鼠痘病毒检测方法

GB/T 14926. 202001代费 GB/T 14926. 20-1994

Laboratory animalMethod for examination ofEetromelia virus (Ect.. )

1范围

本标准规定了鼠痘病毒（Ect）的检测方法、试剂等.本标准适用于小鼠Ect的检测.

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用面构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.

GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.51-2001实验动物免疫酶试验 GB/T14926.52-2001实验动物免疫荧光试验GB/T14926.55-2001实验动物免疫酵组织化学法

3原理

Ect抗原. 根据免疫学原理，采用Ect.抗原检测小鼠血清中Ect抗体：或用已知Ect抗体检测小鼠组织中的

4主要试剂和器材

用Ect，感染BHK21细胞，当病变达十十~十时收获.冻醚三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原.

4.1.1.2正常抗原

BHK21细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片面获得的上清液.

4.1.2抗原片

Ect感染BHK21细胞，接种后2~3d，病变达~时用胰酶消化分散，PBS洗涤，涂片.室温干燥后，冷丙酬固定10min，一20C保存.

4.1.3阳性血清

用丙内脂灭活Ect抗原，免疫清洁或SPF小鼠所获得的抗血清.

中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.19-2001代替GB/T 14926.191994

实验动物 汉坦病毒检测方法

Laboratory animalMethod for examination ofHantavirus(HV)

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前

物流行性出血热病毒检测方法“改称为“实验动物汉坦病毒检测方法”.删除了GB/T14926.19一 本标准是对GB/T14926-19-1994《实验动物流行性出血热病毒检测方法》的修订.将“实验动1994中"5检测方法和结果判定”的内容，增加了检测病毒抗体的酶联免疫吸附试验和免疫荧光试验.

本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.本标准起草单位：中国实验动物学会.本标准主要起草人：贺争鸣. 本标准于1994年1月首次发布.

中华人民共和国国家标准

实验动物 汉坦病毒检测方法

GB/T 14926.19-2001代梦GB/T 14926.191994

Laboratory animalMethod for examination ofHantavirus (HV)

1范围

本标准规定了汉坦病毒（HV）的检测方法、试剂等.本标准适用于小鼠、大鼠HV的检测.

2引1用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.

GB/T14926.50-2001实验动物酵联免疫吸附试验GB/T14926.52-2001实验动物免疫荧光试验

3原理

根据免疫学原理，采用HV抗原检测小鼠、大鼠血清中HV抗体，

4主要试剂和器材

4.1试剂4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原

在生物安全柜内，用Hantaan型或Seoul型毒株感染的E6细胞，当特异性荧光达时，即可收获培养物，冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原.

4.1.1.2正常抗原

E6细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片面获得的上清液.

4.1.2抗原片

在生物安全柜内，用Hantaan型或Seoul型毒株感染E6细胞，每2~3d更换维持液，培养7~10d，用IFA法测定细胞内特异性荧光.当荧光达十十时，将细胞用胰酶分散，用PBS洗涤，涂片.室 温干燥的同时，在紫外线下20cm处照射30min，冷丙酮固定10min，一20C保存.

4.1.3阳性血清

用B丙内脂灭活HV抗原，免疫清洁或SPF小鼠或大鼠所获得的抗血清.

4.1.4阴性血清

中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.18-2001代替GB/T14926.181994

实验动物

淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒检测方法

Laboratory animalMethod for examination oflymphocytic choriomeningitis virus (LCMV)

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前

本标准是对GB/T14926.18-1994《实验动物淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒检测方法）的修订.

本标准删除了GB/T14926.18-1994中“酶联免疫吸附试验、同接免疫荧光法和免疫酶染色法"的内容.

本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.

本标准起草单位：中国实验动物学会.

本标准主要起草人：贺争鸣.

本标准于1994年1月首次发布.

中华人民共和国国家标准

实验动物 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒检测方法

GB/T 14926.18-2001代特GB/T 14926.18-1994

Laboratory animalMethod for examination oflymphocytic choriomeningitis virus (LCMV)

1范围

本标准规定了淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LCMV）的检测方法、试剂等，本标准适用于小鼠、豚鼠、地鼠LCMV的检测.

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用画构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.

GB/T14926.50-2001实验动物酵联免疫吸附试验GB/T14926.52-2001实验动物免疫荧光试验GB/T14926.51-2001实验动物免疫酵试验

3原理

根据免疫学原理，采用L.CMV抗原检测小鼠、鼠、地鼠血清中I.CMV抗体.

4主要试剂和器材

4.1试剂：4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原

在生物安全柜内，用LCMV感染Vero细胞，当病变达十~时，收获培养物.冻融三次或超声波处理后低速离心去除细胞碎片，上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原.

41.1.2正常抗原

Vero细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液.

41.2抗原片

在生物安全柜内，LCMV感染Vero细胞，每2~3d更换维持液，培养7~10d，用IFA法测定细胞内特异性荧光.当荧光达十十~十十十时，将细胞用胰酵消化分散，PBS洗涤涂片.室温干燥的同时，在紫外线下20cm处照射30min，冷丙酮固定10min，-20C保存.

4.1.3阳性血清

用丙内脂灭活ICMV抗原，免疫清洁或SPF小鼠、豚鼠、地鼠所获得的抗血清.4.1.4阴性血清

中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.17-2001代替GB/T 14926.17-1994

实验动物 绿脓杆菌检测方法

Laboratory animal-Methodfor examination ofPseudomonas aeruginosa

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前

本标准是对GB/T14926.17-1994实验动物绿杆菌检测方法》的修订.

本标准增加了“6.3.5半固体动力试验”和“6.3.642C生长试验”和“5检验程序”.因血清型鉴别试剂难得且血清型鉴别只是必要时才采用，故利除原标准”5.6血清学试验”.氧化酵试验阳性是假单胞菌属的重要生化指标，且假单胞菌属中，产生绿色色素是绿脓杆菌的特征.因此，在NAC液体培养中，当有绿色色素和菌膜产生时，通过革兰染色、氧化酵试验可直接判定结果.

本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.

本标准主要起草人：黄韧.

本标准于1994年1月首次发布.

中华人民共和国国家标准

实验动物绿脓杆菌检测方法

Laboratory animalMethod for examination ofPseudomonas aeruginosa

1范围

本标准规定了实验动物绿旅杆菌的检测方法.本标准适用于小鼠、大鼠、鼠、地鼠、兔绿脓杆菌的检测.

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应操讨使用下列标准最新版本的可能性.

GB/T14926.42-2001实验动物细菌学检测标本采集

3原理

基培养、菌体检验和生化试验进行鉴定. 绿杆菌是革兰阴性杆菌，具有产生绿色色索和氧化酶等生化试验特征，因此，可利用选择性培养

4主要设备和材料

4.1普通恒温培养箱.4.2生物显微镜.

5培养基和试剂

5.1NAC液体培养基.5.2NAC琼脂平m.5.4糖发醇培养基. 5.3普通营养琼脂平m.5.5西蒙氏柠檬酸盐培养基.5.6尿素培养基.5.7营养明胶. 5.8氧化酶试剂.5.9确酸盐培养基.

中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.16-2001代替GB/T 14926.16-1994

实验动物 乙型溶血性链球菌检测方法

Laboratory animal-Method for examination ofβ-hemolyticstreptococcus

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前 言

本标准是对GB/T14926.16一1994（实验动物乙型溶血性链球菌检测方法》的修订

本标准增加了“6.3.3生化试验”几种具有代表性的动物致病性链球菌的生化特性：增加了“6.3.4链激酶试验阳性”：删除了GB/T14926.16-1994中“5.3.3CAMP试验”、“5.3.4氯化钠-七叶灵试验“和“5.3.5马尿酸钠水解试验”

本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.

本标准起草单位：中国实验动物学会.

本标准主要起草人：黄韧.

本标准于1994年1月首次发布.

中华人民共和国国家标准

实验动物乙型溶血性链球菌检测方法

Laboratory animalMethod for examination of β-hemolyticstreptococcus

1范围

本标准规定了实验动物乙型溶血性链球菌的检测方法.

本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔乙型溶血性链球菌的检测.

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用面构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性，

GB/T14926.43-2001实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂 GB/T14926.42-2001实验动物细菌学检测标本采集

3原理

此，可通过菌落生长、菌体和生化反应特征进行鉴定. 乙型溶血性链球菌是3溶血性的革兰阳性球菌呈链状排列，具有链激酶试验阳性等生化特征，因

4主要设备和材料

4.1普通恒温培养箱.4.2生物显微镜. 4.3恒湿水浴箱.

5培养基和试剂

5.1血琼脂平m.5.2糖发酵培养基. 5.3杆菌肽纸片.5.40.25%氯化钙.5.5肉浸液培养基.5.6草酸钾.

中华人民共和国国家标准

GB/T 14926.15-2001代替GB/T 14926.15-1994

实验动物 肺炎链球菌检测方法

Laboratory animal-Method for examination ofStreptococcuspneumonia

中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布

前 言

本标准是对GB/T14926.15-1994《实验动物肺炎链球菌检测方法》的修订.

本标准增加了“6.3.4菊糖发醇试验“和°6.3.5Optochin试验阳性”：对GB/T14926.15-1994中"5.3.3胆盐溶解试验”的内容作了详细的补充.

本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口.

本标准起草单位：中国实验动物学会.

本标准主要起草人：黄韧.

中华人民共和国国家标准

实验动物肺炎链球菌检测方法

Laboratory animalMethod for examination ofStreptococcus pneumonia

1范围

本标准规定了实验动物肺炎链球菌的检测方法.本标准适用于小鼠、大鼠、鼠、地鼠和免肺炎链球菌的检测.

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性.

GB/T14926.42-2001实验动物细菌学检测标本采集 GB/T14926.43-2001实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂

3原理

化试验等，可与其他细菌区别. 肺类链球菌是.溶血性的革兰阳性球菌，且具有特定的生化反应特征，因此，通过血平Ⅲ培养和生

4主要设备和材料

4.1普通恒温培养箱.4.2生物显微镜.

5培养基和试剂

5.1葡萄糖肉浸液培养基：5.2血琼脂平皿.5.3血清肉汤培养基. 5.4菊发酪管.5.5英膜染色液.5.6革兰染色液.5.710%去氧胆酸钠溶液. 5.8Optochin纸片.

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