NY/T 2476-2025 大白菜品种鉴定 SSR分子标记法.pdf

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中华人民共和国农业行业标准

NY/T 2476-2025

代替 NY/T 2476-2013

大白菜品种鉴定 SSR分子标记法

Identification of heading Chinese cabbage varieties-SSRmarker method

中华人民共和国农业农村部 了发布

目 次

前言-1范围.3术语和定义 2规范性引用文件4缩略语原理.7溶液配制 主要仪器设备及试剂8引物信息及使用参照品种及使用10操作程序11结果判定与表述 附录A(规范性) 主要仪器设备及试剂附录B(规范性) 溶液配制附录C(规范性) 引物及序列附录D(资料性) 引物相关信息 10附录E(资料性) 附录F(资料性)引物分组 参照品种相关信息 1415

前言

本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.

相比,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下: 本文件代替NY/T2476-2013《大白菜品种鉴定技术规程SSR分子标记法》,与NY/T2476-2013

a)增加了CRIB1-43(A1连锁群)、CRIB1-54(A1连锁群)、CRIB2-23(A2连锁群)、CRIB3-22(A3连锁群)、CRIB3-28(A3连锁群)、CRIB4-10(A4连锁群)、CRIB5-11(A5连锁群)、CRIB6-3(A6连锁群)、CRIB6-23(A6连锁群)、CRIB7-19(A7连镇群)、CRIB8-12(A8连锁群)、CRI10-30(A10连锁群)、CRI10-40(A10连锁群)等13对引物及相应的等位变异和参照品种:

b)删除了cnu_m139a(A1连锁群)、nia_m086a(A1连锁群)、nia_m098a(A1连锁群)、cnu_m073a(A3连锁群)、cnu_m288a(A3连锁群)、cnu_m327a(A3连锁群)、nia_m101a(A3连锁群)、nia_m049a(A6 连锁群)、cnu_m050a(A6 连锁群)、cnu_m149a(A6 连锁群)、cnu_m016a(A9 连锁群)、nia_m038a(A6连锁群) nia_m035a(A10连锁群)等13对引物及相应的等位变异和参照品 种.

请注意本文件的某些内容可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别专利的责任.

本文件由农业农村部种业管理司提出.

本文件由全国植物新品种测试标准化技术委员会(SAC/TC277)归口.

本文件起草单位:山东省农业科学院作物研究所、农业农村部科技发展中心.

本文件主要起草人:李汝玉、郑永胜、张晗、王丽媛、王穆穆、马莹雪、王晖、王东建、段丽丽、李华、安聪聪、耿慧晶、程惠敏、冯艳芳、王玮.

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为:

2013年首次发布为NY/T2476-2013;

一本次为第一次修订.

大白菜品种鉴定SSR分子标记法

1范围

本文件规定了利用简单重复序列(SSR)标记进行大白菜[Brassica rapa L.8sp.Pekinensis(Lour.)Olsson品种鉴定的术语和定义、缩略语、原理、主要仪器设备及试剂、溶液配制、引物信息及使用、参照品 种及使用、操作程序、结果判定与表述.

本文件适用于大白菜品种DNA分子数据采集和品种鉴定.

2规范性引用文件

仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本 下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款,其中,注日期的引用文件,文件.

GB/T3543.2农作物种子检验规程扦样GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 NY/T2594植物品种鉴定DNA分子标记法总则

3术语和定义

NY/T2594界定的术语和定义适用于本文件.

4缩略语

下列缩略语适用于本文件.APS:过硫酸铵(ammonium persulphate).bp:碱基对(base pair).CTAB:十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium bromide). DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid).dNTPs:脱氧核糖核书三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphates).EDTA;乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid).PCR:聚合酶链式反应(polymerase chain reaetion). PAGE:聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis).SSR:简单重复序列(simple sequence repeat).Taq 酶:耐热 DNA 聚合酶(Taq-DNA polymerase).TBE:三羟甲基氨基甲烷-硼酸盐-乙二胺四乙酸(Tris-borate-EDTA).TEMED四甲基乙二胺(N.N NN'-tetramethylethylenediamine). TE:三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸(Tris-EDTA).Tris:三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)methyl aminomethane THAM).

5原理

大白菜品种基因组中存在着大量能够稳定遗传的SSR标记,不同大白菜品种在同一SSR的重复次数存在差异,这种差异可通过PCR扩增及电泳方法进行检测,进面区分不同的品种.

6主要仪器设备及试剂

主要仪器设备及试剂见附录A.

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