中华人民共和国国家标准
GB 31657.12-2025
代替GB/T 22945-2008 和 GB/T 22995-2008
食品安全国家标准 蜂产品中氨基糖苷类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
National food safety standardDetermination of aminoglycoside residues in bee products by liquidchromatography-tandemmass spectrometry method
中华人民共和国农业农村部中华人民共和国国家卫生健康委员会发布国家市场监督管理总局
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
本文件代替GB/T22945-2008（蜂王浆中链霉素、双氢链霉素和卡那霉素残留量的测定液相色谱质谱法》.与上述2个标准相比，除结构调整和编辑性改动，标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式和标准范围增加药物品种数量外，主要变化如下：
a）与GB/T22945-2008相比，标准范围中增加了蜂蜜的检测，待测物质增加了庆大霉素、新霉素、b）与GB/T22995-2008相比，标准范围中增加了蜂王浆的检测，待测物质增加了庆大霉素、新霉 安普霉素、大观霉素、潮霉素和妥布霉素；素、安普霉素、大观霉素、潮霉素和妥布霉素.
本文件及其所替代文件的历次版本发布情况为：
食品安全国家标准 蜂产品中氨基糖苷类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
1范围
本文件适用于蜂蜜和蜂王浆中链霉素、双氢链霉素、庆大霉素、新霉素、卡那霉素、安普霉素、大观霉素、潮霉素、妥布霉素残留量的测定.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理
合型弱阳离子交换固相萃取柱净化，复溶液用液相色谱-串联质谱测定，外标法定量. 蜂蜜和蜂王浆中残留的药物用磷酸盐缓冲液提取，提取液分成两等份后分别经混合型强阳离子和混
5试剂和材料
以下所用试剂，除特殊注明外均为分析纯试剂，水为符合GB/T6682规定的一级水.
5.1试剂
5.1.1甲醇（CHOH）：色谱纯.5. 1. 2胰蛋白酶（C;HOP)：1 000 U/mg~2 000 U/mg5.1.3七氟丁酸（C，F COOH）：HFBA，色谱纯.5.1.4乙酸（CHCOOH）：色谱纯.5.1.5乙酸铵（CHCOONH）：色谱纯.5.1.6甲酸（HCOOH）：色谱纯.5.1.7乙晴（CHCN）：色谱纯. 5.1.8乙二胺四乙酸二钠（NaEDTA）.5.1.9三氯乙酸（CCICOOH).5.1.10氢氧化钠（NaOH）.5.1.11氨水（NH OH）.5.1.12磷酸二氢钾（KHPO）.
5.2溶液配制
5.2.150%甲醇溶液：取甲醇10mL.用水稀释至20mL.5.2.20.3%乙酸水溶液：取乙酸300pL.用水稀释至100mL.
GB 31657. 12-2025
5.2.30.3%乙酸水-甲醇溶液：取0.3%乙酸水溶液5mL.用甲醇稀释至10mL.5.2.4磷酸盐缓冲液（含5%三氯乙酸和0.4mmol/L.乙二胺四乙酸二钠）：取磷酸二氢钾1.36g、乙二胺四乙酸二钠0.15g和三氯乙酸50g，用水溶解并稀释至1000mL.5.2.6乙酸甲醇溶液：取乙酸10mL和甲醇70mL，用水稀释至100mL，混匀. 5.2.5氢氧化钠溶液（5mol/L）：取氢氧化钠20g，用水溶解并稀释至100mL，混匀.5.2.7氨水甲醇溶液：取氨水20mL和甲醇60ml.用水稀释至100mL，混匀.5.2.8乙酸铵溶液（0.5mol/L）：取乙酸铵3.85g.用水溶解并稀释至100ml.5.2.90.1%甲酸溶液（含0.5mmol/L乙酸铵）：取甲酸1mL和0.5mol/L乙酸铵溶液1mL 加水稀释至1 000mL，混匀.
5.3标准品及其纯度
录A. 链霉素、双氢链霉素、庆大霉素、新霉素、卡那霉素、安普霉素、大观霉素、潮霉素和妥布霉素，具体见附
5.4标准溶液配制
5.4.1标准储备液：分别准确称取11种氨基糖苷类药物标准品10mg用0.3%乙酸水-甲醇溶液溶解，并定容至10mL.配制成1000μg/mL的标准储备液放置于塑料材质容器中.于-18C避光保存，有效期3个月，
5.4.2混合标准工作液：精密量取11种氨基糖苷类药物标准储备液各125pL.于25mL容量瓶中，用 0.3%乙酸水溶液定容至刻度，配制成浓度为5μg/mL的氨基糖苷类药物混合标准工作液，放置于塑料材质容器中，于一18℃避光保存，有效期1个月.
5.5材料
5.5.1混合型强阳离子交换固相萃取柱：200mg/6mL，或相当者.5.5.2混合型弱阳离子交换固相萃取柱：150mg/3mL，或相当者.5.5.3聚醚滤膜：0.22um.
6仪器和设备
6.1液相色诺-串联质谱仪：配有电喷雾电离源.6.2涡旋混合器.6.3高速冷冻离心机：转速10000r/min或以上.6.4水浴振荡器.6.5氮吹仪. 6.6分析天平：感量0.00001g和0.01g-6.7固相萃取装置.6.8pH计.6.9超声波清洗机，
7试样的制备与保存
7.1试样的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试蜂产品，将其搅拌均匀.对有结晶的蜂蜜样品，在密闭情况下，置于不超过60℃C的水浴中解晶，待样品全部融化后搅匀，冷却至室温.制备好的试样置于样品瓶中，密封，并做上标记.
