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中华人民共和国农业行业标准
花生种质资源白绢病抗性田间 鉴定技术规程
Technical code of practice for evaluation ofresistance to stem rot(Sclerotium rolfsi)in peanut germplasm
中华人民共和国农业农村部 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由农业农村部种业管理司提出.
本文件由全国农作物种子标准化技术委员会(SAC/TC37)归口
本文件起草单位:中国农业科学院油料作物研究所、山东省农业科学院生物技术研究中心、河南省农业科学院植物保护研究所、四川省农业科学院经济作物研究所.
本文件主要起草人:晏立英、廖伯寿、雷永、姜慧芳、宋万朵、康彦平、王志慧、陈玉宁、淮东欣、万丽云、王欣、赵术珍、王振宇、徐永菊.
花生种质资源白绢病抗性田间鉴定技术规程
1范围
本文件规定了花生白绢病田间抗性鉴定的接种物制备、抗性鉴定、抗病性评价.本文件适用于花生种质资源白绢病抗性的田间鉴定和评价.
2规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件.
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1花生白绢病peanut stem rot由齐整小核菌(Sclerotiumrolfsi)引起的一种土传真菌病害,其症状和病原特征见附录A.
病原分离物pathogenic isolate
3.2从花生白绢病发病植株或者菌核分离获得病原物的纯培养物.
接种物inoculum用于接种的花生白绢病原菌培养物(菌丝培养物或菌核).
3. 4田间接种field inoculation在田间条件下,将白组病原接种物放置于花生植株茎基部或茎基部周围土表,并创造条件使之发病的过程.
通过对植物个体发病程度(病情级别)数值的计算获得的群体发病程度的数值化描述形式,是描述发
病严重度的综合指标.
相对抗病指数relativeresistanceindex
感病材料与鉴定材料病情指数的差值与感病材料病情指数的比值,记作RRI.
3.7 抗性评价resistance evaluation根据采用的技术标准判别植物对特定病害反应程度或抵抗水平的描述.
4接种物制备
4.1病原菌
经鉴定的花生白绢病原菌(Sclerotiumrolfsii).
4.2.1马铃薯琼脂培养基(PDA)制备
去皮马铃薯200g切片(块)水沸后煮20min用2层纱布过滤后的滤液、葡萄糖20g、琼脂15g,用蒸馏水定容至1 L,0.1MPa、121C高压灭菌20min.
NY/T 4483-2025
4.2.2燕麦粒培养基
新鲜干燥燕麦粒用自来水浸泡4h后,转移到三角瓶或耐高压试剂瓶,装量为容器的1/3.0.1MPa、121℃连续高压灭菌30min2次,冷却到室温备用.
4.3接种物繁殖
在超净工作台上,将保存的花生白组病原菌试管斜面菌种,转接到马铃薯琼脂培养基(PDA)平板上,置30C下培养3d.挑取菌落边缘5mm的新鲜菌块,接种到燕麦粒培养基上,于30C避光静置培养至菌丝布满燕麦粒(5d~6d).
4.4接种物干燥和保存
架上摊平,35℃~40℃下2d~3d干燥鼓风烘干,在4℃C下保存.接种物应在当年(宜3个月内)使用. 培养好的带菌燕麦粒(接种物)在无菌条件下转移至灭菌的无纺布袋或牛皮纸袋中密封好,放置烘箱
5抗性鉴定
5.1鉴定围选择和试验设计
5.1.1签定圖
选择地势平坦,土壤肥力中等、均匀、一致,排灌方便的无病田块.
5.1.2试验设计
单个小区面积为1.65m×2.0m,平基种植,按随机区组试验设计,每个鉴定材料种植5行,每行种植10穴,每穴单粒,重复3次.每30份~50份鉴定材料设置1个感病对照,试验小区四周应种植不少于2行的保护行,鉴定材料播种时间与大田生产播种时间相同或相近.
5.1.3对照品种选择
5号”等.
5.2接种
5.2.1接种时期
花生饱果成熟期(花生收获前1个月),避开雨天.
5.2.2接种方法
将接种物均匀放置于待鉴定植株茎基部周围的土表(10粒/株~15粒/株),宜1d内完成.
5.2.3接种前后田间管理
接种前应先对鉴定通进行灌溉或降雨后的土壤含水量达到100%的条件下进行接种后若遇连续晴天,应在接种2d后再灌涨1次,达到100%含水量.接种前做好田间中耕除草等工作,接种后至调查前暂停全部农事活动.
5.3病情调查
5.3.1调查时间
感病对照发病达到4级时(接种后约14d)调查.
5.3.2病情级别
花生白绢病的严重度分级见表1.
表1花生白绢病的严重度分级
分级 0级 植袜无症状 症状1级 仅茎部出现症状2级 ≤25%的分枝桔菱3级 25%~50%的分枝枯萎4 级 >50%的分枝枯萎