中华人民共和国国家标准
GB 1903.80-2025
食品安全国家标准
食品营养强化剂 酵母β-葡聚糖
中华人民共和国国家卫生健康委员会 国家市场监督管理总局 发布
食品安全国家标准
食品营养强化剂酵母-葡聚糖
1范围
本标准适用于以酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae）为原料，经过细胞破壁提取，酸、碱处理，分离纯化，干燥等工序加工后得到的3-1.3/g-1.6-葡聚糖为主要成分的食品营养强化剂酵母β-葡聚糖.
注：Seccharomres cerervisiae 的种名译为“酿酒酵母”，卫生部公告2012 年第6号中“以面包酵母（Saccheromyces cerevisiae）为原料“所定义的“面包酵母“为该酵母的英译俗名.
2分子式、结构式和相对分子质量
2.1分子式
(CHO）.n：聚合度，125≤n≤25000
2.2结构式
2.3相对分子质量
20000~（按2022年国际相对原子质量）
3技术要求
3.1感官要求
感官要求应符合表1的规定.
表1感官要求
项目 要求 检验方法色泽 浅黄色至黄褐色状态 粉末 取适量试样置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下现 察其色泽和状态并噢其气味气味 具本品特有的气味
3.2理化指标
理化指标应符合表2的规定.
表2理化指标
项目 指标 检验方法酵母3-葡聚糖含量/% 75 附录A中A.3蛋白质，v/% 3 5 GB 5009 5 凯氏定氮法脂助v/% 10 0 GB5009 6酸水解法水分/% 8.0 GB5009 3直接干燥法灰分/% 3 0 GB5009.4食品中总灰分的测定铅(Pb)/(mg/kg) 0 5 GB 5009 12 或 GB 5009 75总确(以 As 计)/(mg/kg) 0 5 GB 5009 11 d GB 5009 76(Cd)/(mg/kg) 总汞(以 Hg 计)/(mg/kg) 0 05 0 5 GB 5009 17 GB 5009 15
3.3微生物限量
微生物限量应符合表3的规定.
表3微生物限量
采样方案及限量（若非指定，均以CFU/g表示）项目 n e m M 检验方法菌落总数 5 2 10 000 50 000 GB 4789 2大肠菌群 5 2 10 100 GB 4789 3平板计数法沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 5 0 0/25 g 0/25 g GB 4789 105 0 GB 4789.4试样的采集及处理按GB4789.1执行.
检验方法
附录A
A.1一般规定
本标准所用试剂和水在未注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水.试验中所用标准溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品在未注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602和GB/T603的规定制备，试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液.
A.2鉴别试验
酵母3-葡聚糖红外特征光谱鉴别采用澳化钾压片法，按照GB/T6040进行试验.酵母B-葡聚糖的红外光谱图应符合酵母3-葡聚糖标准品红外光谱图特征（附录B），在3419cm附近有较宽、较强的吸收峰（糖类的O-H伸缩振动吸收），在2923cm附近（糖类的C-H伸缩振动吸收）和889cm附近（糖类3-构型特征吸收）有较弱的吸收峰.
A.3酵母β-葡聚糖含量的测定
A.3.1酸水解法（第一法）
用水溶解试样，将不溶物滤出，用水洗涤滤渣，使之与试样主体完全分离，烘干后用天平称出水不溶性杂质的质量.
A.3.1.1酸水解法原理
光检测器检测，采用外标法定量测定. 酵母β葡聚糖试样经酸水解后，试样中的葡萄糖和其他成分经高效液相色谱柱分离，通过示差折
注：在酵母β葡聚糖水解过程中.可能存在其水解不彻底以及水解产物葡萄糖因高温部分发生其他副反应的现象导致检测结果中解母葡聚糖含量偏低
A.3.1.2仪器和设备
A.3.1.2.1电子天平：感量为0.001gA.3.1.2.2恒温干燥箱：100℃土2℃.A.3.1.2.3恒温水浴锅：30C土1℃C.A.3.1.2.5涡旋混合器. A.3.1.2.4高压灭菌锅.A.3.1.2.6高效液相色谱仪：带示差检测器.
A.3.1.3试剂和材料
A.3.1.3.1水：GB/T 6682，一级水.A.3.1.3.2盐酸：37%.A.3.1.3.3无水葡萄糖（CAS号：50-99-7)纯度：AR，≥99.5%.A.3.1.3.4葡萄糖标准溶液（2.0g/L)：称取0.2g（精确至0.001 g）经过98“C~100℃干燥2h的葡萄糖（A.3.1.3.3），加水（A.3.1.3.1）溶解并定容至100mL，摇匀.A.3.1.3.5酵母g-葡聚糖对照品：已知纯度，且纯度≥75%.
1 000mL摇匀.
A.3.1.3.7醋酸纤维素膜：孔径0.22pm.
A.3.1.4试样处理
称取0.4g（精确至0.001g）试样或酵母3-葡聚糖对照品（A.3.1.3.5）至20mL带螺帽的试管中，加人6.0mL盐酸（A.3.1.3.2），盖紧振荡，得到均一的悬浮液.将试管放人30C水浴中保持45min（每15 min用涡旋混合器振荡混合一次）.将水溶后的悬浮液转移至200mL螺旋盖耐热瓶中，用100mL~120mL的水（A.3.1.3.1）分儿次洗涤试管，洗涤液井人带螺旋盖耐热瓶中，将带螺旋盖耐热瓶放入高压灭菌锅，经121C，60min灭菌处理.取出后冷却至室温用氢氧化钠溶液（A.3.1.3.6）调至 pH为6~7后转移至200mL容量瓶中，用水（A.3.1.3.1）定容，混匀.使用0.22μm孔径的醋酸纤维素膜过滤备用.
A.3.1.5参考色谱条件
A.3.1.5.1色谱柱：糖柱（6.5mm×300mm）或具有同等分析效果的分离柱.A.3.1.5.2流动相：纯水.A.3.1.5.3柱温：80℃A.3.1.5.4流速：0.5 mL/ min.A.3.1.5.5进样量：20μL.
A.3.1.6标准曲线的绘制
中 用水（A.3.1.3.1）定容并摇匀，得到葡萄糖质量浓度分别为400mg/L.800mg/L、1200mg/L、1 600mg/L、2000mg/L的系列标准溶液.在A.3.1.5色谱条件下进样20uL.根据色谱峰面积和葡 萄糖浓度绘制标准曲线.
A.3.1.7试样及对照品的测定
在同样的色谱条件下，将经A.3.1.4方法处理后的试样和酵母B-葡聚糖对照品溶液分别注入色谱仪中，记录各色谱峰的保留时间和峰面积，用葡萄糖标准溶液的色谱峰保留时间定性，用葡萄糖标准溶 液色谱峰的峰面积定量.
A.3.1.8结果计算
酵母3葡聚糖的含量按公式（A.1)计算：
式中：
X-试样中酵母β-葡聚糖的含量，单位为克每百克（g/100g）；克每升（mg/L)；0.2一试样或标准品酵母-葡聚糖处理后定容的体积，单位为升（L）；100-百分含量转换系数；m称取试样的质量，单位为克（g）； 1000-毫克与克的转换系数：
