GB
中华人民共和国国家标准
GB 23200.27-2016代替SN/T1734-2006
食品安全国家标准 水果中4，6-二硝基邻甲酚残留量的测定 气相色谱-质谱法
National food safety standards-
Determination of 4 6-dinitro-cresol residue in fruits
Gas chromatography - mass spectrometry
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 中华人民共和国农业部 国家食品药品监督管理总局
发布
前言
法》. 本标准代替SN/T1734-2006《进出口水果中4.6-二硝基邻甲酚残留量的检验方法气相色谱-质谱
本标准与SN/T1734-2006相比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式：一标准名称中“进出口水果”改为“水果”.一标准范围中增加“其它食品可参照执行”. 本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-SN/T 1734-2006.
食品安全国家标准
水果中4.6-二硝基邻甲酚残留量的测定气相色谱-质谱法
1范围
本标准规定了水果中4.6-二硝基邻甲酚残留量的气相色谱-质谱检验方法. 本标准适用于苹果、梨中4.6-二硝基邻甲酚残留量的检验，其它食品可参照执行.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法.
3原理
水果样品中4，6-二硝基邻甲酚残留物用二氯甲烷提取，吹氮至干后以乙晴溶解，用N-特丁基二甲基硅)-N-甲基三氟乙酸胺（MTBSTFA)衍生化，用气相色谱-质谱测定，外标法定量.
4试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水.
4.1试剂
4.1.1二氯甲烷（CHCL）：优级纯.4.1.2乙晴（CHCN）：色谱纯.4.1.4衍生化试剂N-(特丁基二甲基硅)-N-甲基三氟乙酞胺（MTBSTFA）：纯度99%. 4.1.3无水硫酸钠（NaSO4）：经650C灼烧4h，置于干燥器中备用.
4.2标准品
4.2.14 6-二硝基邻甲酚标准品（C HNO CASNo.:534-52-1）：纯度99%.
4.3标准溶液配制
4.3.14.6-二硝基邻甲酚标准储备液：准确称取10mg4.6-二硝基邻甲酚标准品，用乙晴溶解并配制4.3.24.6-二硝基邻甲酚标准工作液：根据需要用乙晴将4 6-二硝基邻甲酚标准储备液稀释成适当浓 成浓度为100mg/L的标准储备液，可在冰箱中0C~4C保存3个月.度的标准工作液，可在冰箱中0℃~4C保存1个月.
5仪器和设备
5.1气相色谱-质谱联用仪，配电子轰击源.5.2分析天平：感量0.0001g和0.01g. 5.3粉碎机.5.4离心机：2000r/min.5.5涡旋混合器.5.6吹氮浓缩仪. 5.7培养箱.5.8聚丙烯离心管：15mL，具塞.
6试样制备与保存
6.1试样制备
取代表性样品约500g，取样部位按GB2763附录A执行，（不可用水洗）切碎后，用搞碎机将样品加工成浆状，混匀，装入洁净容器，密封并标明标记.
6.2试样保存
试样于-5℃以下避光保存.在制样操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化.
7分析步骤
7.1提取
在激涡混合器上充分混匀3min，并于2000r/min离心5min，将二氯甲烷转移入另一个15mL离心管中， 称取制备好的均匀样品约1g（精确至0.0lg）于15mL离心管中，加入3g无水硫酸钠和5mL二氯甲烷，用5mL二氯甲烷重复提取一次，合并提取液，于50C氮吹浓缩至近干.
7.2衍生化
吹氮干燥后于离心管中加入0.4mL乙腊溶解残余物，再加入100μLMTBSTFA，封口，80C下恒温衍生化1h.标准工作液同样也加入100uLMTBSTFA，封口，在上述条件下进行衍生化.衍生化后溶液过0.22um微孔滤膜，供气相色谱-质谱联用仪测定.
7.3测定
7.3.1气相色谱-质谱参考条件
a) 色谱柱：HP-5MS石英毛细管柱：30mx0.25mm（内径）x0.25um膜厚，或相当者. 色谱柱温度：100C（1min）b) c) 进样口温度：210℃.d) 传输线温度：250℃.f) 进样量：1gL 载气：氮气，纯度99.999%，流量1.0mL/min.g) 进样方式：无分流进样，1min后，打开分流阀，分流比20：1.h) i) 电离方式：EL 电离能量：70eV.j) 测定方式：选择离子监测方式（SIM).1）溶剂延迟：5min. k) 监测离子：m/z255、209、239、179，定量离子为m/z255.
7.3.2色谱测定与确证
后的标准工作溶液和样品中4，6-二硝基邻甲酚衍生物的响应值均应在仪器检测的线性范围内.对衍生化 根据样品中4，6-二硝基邻甲酚含量情况，选择与样品峰面积响应相近浓度的标准工作溶液.衍生化后标准工作溶液和样品等体积参插进行测定.在上述色谱条件下，4，6-二硝基邻甲酚衍生物的保留时间约为9.31min.在相同实验条件下样品中待测物质的色谱保留时间与标准工作液相同并且在扣除背景后 的样品质量色谱中所选离子均出现，经过对比所选择离子的丰度比与标准品对应离子的丰度比，其值在允许范围内（允许范围见表1）则可判定样品中存在对应的待测物.标准品SIM色谱图及全扫描质谱图参见附录A中图A.1，图A.2.
表1使用气相色谱-质谱定性时相对离子丰度最大容许误差
相对丰度（基峰） % 0520 %至 50 % >10 %至 20 % ≤10 %允许的相对偏差 ±20 % ±25 % ±30 % ±50 %
7.4空白实验
除不加试样外，均按上述测定步骤进行.
8结果计算和表述
按下式（1）计算试样中4.6-二硝基邻甲酚的含量：
式中：
A-标准工作溶液中4，6-二硝基邻甲酚衍生物峰面积：
GB23200.272016
c一标准工作溶液中4，6-二硝基邻甲酚浓度，单位为毫克每升，mg/L：一最终样液代表的试样质量，单位为克，g： V-样液最终定容体积，单位为毫升，ml.注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字.
9精密度
9.1在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录B的要求.
9.2在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合 附录C的要求.
10定量限和回收率
10.1定量限
本方法4.6-二硝基邻甲酚的定量限均为0.01mg/kg.
10.2回收率
4.6-二硝基邻甲酚在添加浓度0.01mg/kg时，回收率在74.0%~105.0%之间.4.6-二硝基邻甲酚在添加浓度0.05mg/kg时，回收率在72.0%~101.0%之间.4 6-二硝基邻甲酚在添加浓度0.10mg/kg时，回收率在81.1%~105.0%之间.
