中华人民共和国国家标准
GB 5009.33-2025
食品安全国家标准
食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定
中华人民共和国国家卫生健康委员会 国家市场监督管理总局 发布
前言
本标准与GB5009.33-2016相比，主要变化如下：一第一法修改了样品的前处理方法； 增加了连续流动分析-分光光度法为第三法，将原第三法修改为第四法；一第二法修改了样品的前处理方法、标准溶液的配制方法和还原效率的计算方法；一修改了方法的检出限和定量限.
本标准代替GB5009.33-2016《食品安全国家标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》.
食品安全国家标准
食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定
1范围
本标准规定了食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定方法.本标准第一法适用于食品（乳蛋白部分水解配方、乳蛋白深度水解配方、氨基酸配方及氨基酸代谢障码配方的特殊医学用途配方食品除外）中亚硝酸盐和硝酸盐的测定.本标准第二法和第三法适用于食品中亚确酸盐和硝酸盐的测定. 本标准第四法适用于新鲜蔬菜、水果中硝酸盐的测定.
第一法离子色谱法
2原理
试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，经提取和净化，以氢氧化钾溶液或氢氧化钠溶液为淋洗液，阴离子交换柱分离，电导检测器或紫外检测器检测.以保留时间定性，外标法定量.
3试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水.
3.1试剂
3.1.1乙酸（CHCOOH）：色谱纯. 3.1.2氢氧化钾（KOH）.3.1.3氢氧化钠（NaOH）.3.1.4α-淀粉酶：酶活力≥1.5U/mg.
3.2试剂配制
3.2.1乙酸溶液（3%）：量取乙酸3mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀.3.2.2氢氧化钾溶液（1mol/L）：称取5.6g氢氧化钾，加人新煮沸过的冷水溶解，稀释至100mL，混匀.3.2.3氢氧化钠溶液（1mol/L)：称取4.0g氢氧化钠，加人新煮沸过的冷水溶解，稀释至100mL，混匀.
3.3标准品
3.3.1亚硝酸钠标准品（NaNO，CAS号：7632-00-0）：纯度≥99%.或经国家认证并授予标准物质证3.3.2硝酸钠标准品（NaNO，CAS号：7631-99-4）：纯度≥99%.或经国家认证并授予标准物质证书 书的亚硝酸盐标准品.
GB 5009.33-2025
的硝酸盐标准品，
3.4标准溶液的制备
3.4.1亚硝酸钠标准储备液（100mg/L）：准确称取0.1000g于110℃~120℃干燥至恒重的亚硝酸3.4.2硝酸钠标准储备液（100mg/L)：准确称取0.1000g于110℃～120C干燥至恒重的硝酸钠，用 钠，用水溶解并稀释至1000mL，混匀，于2℃～6C冰箱保存.有效期为3个月.水溶解并稀释至1000mL，混匀，于2C~6℃冰箱保存.有效期为3个月.3.4.3亚硝酸钠和硝酸钠混合标准中间液（2.00mg/L）：准确移取亚硝酸钠和硝酸钠的标准储备液各2.00mL于100mL容量瓶中.用水稀释至刻度.临用现配. 3.4.4亚硝酸钠和硝酸钠混合标准使用液：移取亚硝酸钠和硝酸钠混合标准中间液，加水逐级稀释，制成系列标准溶液，质量浓度分别为0mg/L、0.0100mg/L、0.0200mg/L、0 0500mg/L、0.100mg/L、0.200 mg/L、0.500 mg/L1.00 mg/L 和 2.00 mg/L 临用现配.注：可根据样品中目标分析物的含量情况，调整标准曲线的范围至少包含5个浓度水平（不含零点）.
3.5材料
3.5.1滤膜针头滤器：水性，0.22m.3.5.2C净化柱：1mL，或等效柱.使用前依次用10mL甲醇、15mL水活化. 3.5.3Ag净化柱：柱容量2.0离子当量～2.2离子当量，或等效柱.使用前用10mL水活化.3.5.4Na净化柱：柱容量2.0离子当量~2.2离子当量，或等效柱.使用前用10mL水活化.
4仪器和设备
4.1离子色诺仪：配电导检测器及抑制器，或紫外检测器.4.2食物粉碎机.4.3超声波清洗器.4.4电子天平：感量为0.1 mg和0.01g. 4.5离心机：转速10000r/min
5分析步骤
5.1试样制备与贮存
5.1.1试样制备
5.1.1.1液体或半固体样品：取适量样品通过揽拌或振摇使样品充分混匀.5.1.1.3干酪：取适量样品研磨成均匀的泥浆状.为避免水分损失，研磨过程中避免产生过多的热量. 5.1.1.2固体粉状样品：取适量样品通过振摇等手段使样品充分混匀.5.1.1.4其他固体样品：取适量样品粉碎至均匀粉末或制成匀浆，备用.
5.1.2试样贮存
5.1.2.1水果、蔬茶、肉类、水产品等易腐试样应于一18℃及以下温度保存.5.1.2.2其他样品按照产品的贮存条件保存.
5.2试样提取
5.2.1乳及乳制品、婴幼儿配方食品、特殊医学用途婴儿配方食品、特殊医学用途配方食品、燕窝及其2
制品：称取液体试样10g、其他试样1g~2.5g（精确至0.01g），置于150mL具塞锥形瓶中，加水80mL，摇匀，超声30min（必要时加热使之溶解或充分溶胀），取出放置至室温，定量转移至100mL容量瓶中，加入3%乙酸溶液2mL（可根据沉淀效果适当调整用量），加水稀释至刻度，混匀，转移人250mL具塞碘量瓶，于4C放置20min，取出放置至室温，取部分溶液经滤纸过滤，滤液于10000r/min离心15min，上清液备用.
5.2.2易化的高淀粉含量样品：称取试样2.5g（精确至0.01g），置于150mL具塞锥形瓶中，加人α-淀粉酶0.2g（可根据淀粉含量调整酶用量），加水80mL，摇匀.于55℃下酶解30min，从“取出放置至室温”开始同5.2.1操作.
声提取30min，每隔5min振摇1次，保持试样完全分散.于75C水浴中放置5min，从“取出放置至室温”开始同5.2.1操作.
5.3试样净化
氯离子大于100mg/L或目标物有干扰时，则需要依次通过针头滤器、C柱、Ag柱和Na柱，弃去前面 取5.2.1~5.2.3备用溶液约15mL，通过0.22m水性滤膜针头滤器、C柱，弃去前面3mL（如果7mL），收集后面洗脱液待测.
5.4空百试验
除不加试样外，其他操作与试样的操作一致.
5.5仪器参考条件
5.5.1色谱柱：具有氢氧化物选择性，可兼容梯度洗脱的二乙烯基苯-乙基苯乙烯共聚物基质，烷醇基季铵盐功能团的高容量阴离子交换柱，4mm×250mm（带保护柱4mm×50mm），或性能相当的离子色谱柱.
5.5.2淋洗液：氢氧化钾溶液或氢氧化钠溶液，浓度为6mmol/L～70mmol/L.洗脱梯度为6 mmol/L 30 min 70 mmol/L 5 min 6 mmol/L 5 min;流速 1.0 mL/min.
当色谱存在干扰时可选用以下淋洗方式：
氢氧化钾溶液或氢氧化钠溶液，浓度为5mmol/L～50mmol/L.洗脱梯度为5mmol/L33 min.50 mmol/L 5 min.5 mmol/L 5 min:流速 1.3 mL/min.5.5.4进样体积：50L（可根据试样中被测离子含量进行调整）.
5.5.3检测器：电导检测器，检测池温度为35℃C：或紫外检测器，检测波长为226nm.
5.6测定
5.6.1标准曲线的制作
横坐标，以峰高或峰面积为纵坐标，绘制标准曲线. 将标准系列使用液分别注入离子色谱仅中（标准色诺图见附录A图A.1），以标准使用液的浓度为
5.6.2试样溶液的测定
将空白和试样溶液注人离子色谱仅中，得到空白和试样溶液的峰高或峰面积，根据标准曲线得到待测液中亚硝酸钠或硝酸钠的质量浓度.
