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中华人民共和国农业行业标准
微生物肥料功能菌株筛选与鉴评通则
General principles for screening and evaluation of functionalstrains ofmicrobial fertilizer
中华人民共和国农业农村部 发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
本文件由农业农村部种植业管理司提出.
本文件由农业农村部肥料标准化技术委员会归口，
本文件起草单位：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所、农业农村部微生物肥料和食用菌菌种质量监督检验测试中心、农业农村部微生物产品质量安全风险评估实验室（北京）.
玲、贾聪、季洪伟、毛聪琳、刘孝颖. 本文件主要起草人：杨小红、李俊、姜昕、马鸣超、曹风明、关大伟、李力、陈慧君、冯瑞华、葛一凡、朱玲
微生物肥料功能菌株筛选与鉴评通则
1范围
本文件规定了微生物肥料功能菌株筛选与鉴评的一般要求、技术流程和实施要求.本文件适用于微生物肥料功能菌株的筛选、鉴定和评价.
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T41728微生物肥料质量安全评价通用准则 GB/T41727农用微生物菌剂功能评价技术规程NY/T1113微生物肥料术语NY/T1536微生物肥料田间试验技术规程及肥效评价指南NY/T1735根瘤菌生产菌株质量评价技术规范NY/T1736微生物肥料菌种鉴定技术规范 NY/T1847微生物肥料生产菌株质量评价通用技术要求
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3.1
微生物肥料microbial fertilizer
含有特定微生物活体应用于农业生产的制品，通过其中所含微生物的生命活动，增加植物养分的供应量或促进植物生长，增强抗逆性，提高产量，改善农产品品质及农业生态环境.
[来源：NY/T1113-2006.2.1 有修改]
3.2
微生物肥料效应microbial fertilizer effect
微生物肥料对植物产量和抗逆能力、农产品品质、土壤质量改善的效果.
3.3
功能菌株functional strain
具有养分活化、植物促生、植物抗逆、有机物料促腐、土壤改良与修复等效应的微生物.
3. 4
从微生物的群体中，采取相关的技术，选择出目标菌株的过程.[来源：NY/T1113-2006 3.7 有修改]
3.5
富集enrichment
利用不同微生物间的生长代谢及环境耐受差异，通过设置特定条件，促进微生物群体中目标微生物大量生长，实现其数量优势的培养过程.
3.6
别化domestication
NY/T 4543-2025
在微生物培养过程中，通过渐进式加人靶向物质或进入靶向环境等措施，使微生物逐步适应某特定营养或环境的过程.
3. 7
分离isolation 从含有目标微生物的样品中，将目标微生物培养出来的过程.[来源：NY/T1113-2006 3.5，有修改]
纯化purification[来源：NY/T1113-2006 3.6 有修改] 从微生物群体中，去除杂菌，获得同一种目标微生物个体的过程.
对目标微生物进行分类鉴定及菌株功能性、安全性评价的过程.
4一般要求
4.1筛选
4.1.1依据设定的功能目标，确定菌株的筛选方案、程序及技术方法.4.1.2根据目标菌最可能存在的环境位置，确定适宜的采样地点与取样方案，采集目标菌筛选的环境4.1.3依据目标菌类别及其应用环境条件，确定适宜的培养基、培养条件、筛选方法等技术方案. 样品.4.1.4菌株的初筛以菌种数量为主，采用快速、有效及易识别的方法进行.4.1.5菌株的复筛以菌种功能为主，筛选条件应接近生产应用实际，可同时选用2种及2种以上的方法进行，以增加功能菌株的筛选效率.4.1.6宜从土壤、动植物体、特定水体等环境中筛选功能菌株.菌种来源也可以是菌种保藏机构、科研机构等保存的资源.
4.2鉴评
筛选出的待测菌株先进行菌种鉴定和安全性评价，待其安全性符合要求后再进行功能性评价.
5技术流程
微生物肥料功能菌株筛选与鉴评程序主要包括功能菌株的筛选（6.1）和功能菌株的鉴评（6.2）两部（6.1.4）、分离、纯化（6.1.5）和复筛（6.1.6）.功能菌株的鉴评（6.2）包括菌株的分类鉴定（6.2.1）、安全性 分.其中，功能菌株的筛选（6.1）包括6个阶段：样品采集（6.1.1）、富集（6.1.2）、朝化（6.1.3）、初筛评价（6.2.2）和功能性评价（6.2.3）.功能菌株筛选与鉴评技术流程如图1所示.
6实施
6.1筛选实施
6.1.1样品采集操作如下：
a）依据样品类型和目标菌株特性，确定采样的地理位置、气候特征、土壤及植被类型、深度、时间等；b）用无菌器具（铁银、小铲或其他器具），采用对角线法或随机法5点采样，每点取样500g（mL）左c）封口并做好标记，低温储运至实验室，4℃保存： 右，充分混匀，而后采用四分法取大约500g（mL），固体样品过筛处理，放人无菌采样袋或瓶中；d）取部分样品，进行理化和生物指标的分析；e）剩余样品可进人富集、驯化、初筛或分离、纯化.
注1:根瘤菌样品的采集按照附录A中A1的规定执行.
