中华人民共和国农业行业标准
植物性食品中抑食肼、虫酰肼、甲氧虫酰肼、呋喃虫酰肼和环虫酰肼5种双酰肼类农药残留量的同时测定液相色谱一质谱联用法
Determination ofyishijing tebufenozide methoxyfenozide furan tebufenozide and chromafenozide residues in plant foodsLC-MS-MSmethod
中华人民共和国农业部发布
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草本标准由农业部农垦局提出. 本标准由农业部热带作物及制品标准化技术委员会归口.本标准起草单位：农业部热带农产品质量监督检验测试中心.本标准主要起草人：罗金辉、刘春华、阳辛风、乐渊、张群.
植物性食品中抑食阱、虫酰肼、甲氧虫酰肼、呋喃虫酰肼和环虫酰 肼5种双酰肼类农药残留量的同时测定液相色谱一质谱联用法
1范围
类农药的液相色谱一质谱联用测定方法. 本标准规定了植物性食品中的抑食肼、虫酰阱、甲氧虫酰肼、呋腩虫酰胖和环虫酰阱共5种双酰胱
本标准适用于植物性食品中的抑食耕、虫酰耕、甲氧虫酰肼、呋嘀虫酰腊和环虫酰耕共5种双酰肼类农药的检测.
限均为：0.01mg/kg. 本标准抑食阱、虫酰肼、甲氧虫酰阱、映哺虫酰肼和环虫酰肼共5种双酰阱类农药残留的方法定量
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB2763-2014食品安全国家标准食品中农药最大残留限量
GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法（GB/T6379.2-2004，1SO5725-2：1994，IDT）
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T8855新鲜水果和蔬菜的取样方法（GB/T8855-2008，1SO874：1980，IDT） SN/T3592实验室化学药品和样品处理的标准指南
3原理
谱联用法测定，外标法定量. 试样用乙晴匀浆提取，氨基固相萃取小柱净化，用二氯甲烷甲醇（95十5）洗脱农药，液相色谱一质
4试剂和材料
除非另有说明，在分析中仅使用确认的色谱纯试剂和GB/T6682中规定的一级水.
4.1甲醇.4.2乙腩.4.3二氯甲烷.4.4甲酸.4.6洗脱液：甲醇二氯甲烷=595（VV）.
4.5氯化钠，140℃C烘烤4h.
4.7固相萃取柱，氨基柱（Aminopropy）.容积6mL.填充物500mg.
4.8滤膜，孔径0.22gm，有机相.
4.9.1抑食瞬标准物质（yishijing）：CHON;O，CASNo.112225-87-3，纯度≥94.0%.4.9.2甲氧虫酰阱标准物质（methoxyfenozide):CHN;O，CASNo.112225-87-3.纯度≥98.0%.
NY/T2820--2015
4.9.3环虫酰耕标准物质（chromafenozide):CHNO，CAS No.143807-66-3纯度≥99.0%.
4.9.4映畸虫酰肼标准物质（furan tebufenozide）:CH ONO.CAS No.467427-81-1，纯度≥99.5%.
4.9.5虫酰耕标准物质（tcbufenozide)：C：HNO，CASNo.112410-23-8.纯度≥99.0%，
4.10农药标准溶液配制
4.10.1单一农药标准溶液
准品.用甲醇溶解，逐一配制成1000mg/L的单一农药标准储备液，贮于一18℃C以下冰箱中，有效期6 分别准确称取一定量（精确至0.1mg）抑食肼、虫酰瞬、甲氧虫酰肼、呋嘀虫酰肼和环虫酰耕农药标个月.
4.10.2混合农药标准溶液
混合农药标准储备溶液，贮于一18℃以下冰箱中，有效期3个月.
4.10.3基质混合标准工作液
吸取一定体积的混合农药标准储备液，用空白样品基质溶液配制成0.01mg/L.0.02mg/L.0.05mg/L.0.10mg/L、0.20mg/1.、0.50mg/L.浓度的5种双酰腊类农药基质混合标准工作液，贮于4°℃以下冰箱中，有效期1周.
5仪器与设备
5.1液相色谱一串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）.5.2旋转蒸发仪.5.3匀浆机.5.4涡旋混合器. 5.5电子天平.5.6食品加工器.
6分析步骤
6.1试样制备
分后，将其切碎，充分混匀放人食品加工机粉碎，制成试样，标明标记，放人分装容器中于一18C下保存. 按GB/T8855抽取样品，按SN/T3592和GB2763-2014附录A中规定的方法处理样品.经缩备用.
6.2试样前处理过程
6.2.1提取
6.2.1.1蔬菜、水果、食用菌类
称取试样25g（精确至0.01g）于150mL烧杯中，加入50.0mL乙睛后，在匀浆机中高速匀浆2min分层.从100mL具塞量筒中准确吸取10.00mL乙晴溶液于50mL圆底烧瓶中.40C水浴真空旅转蒸发近干，加人4.0mL洗脱液（4.6）溶解残渣，待净化.
6.2.1.2谷物、茶叶、香辛料
称取试样5g（精确至0.01g）于50mL锥形瓶中，加入20.0ml乙，超声30min后用带有滤纸的玻璃漏斗过滤，滤液收集到100mL.圆底烧瓶中，再用10.0ml乙晴洗锥形瓶2次，合并提取液过滤于2
100mL圆底烧瓶中，40C水浴真空旋转蒸发近干.加人4.0mL.洗脱液（4.6）溶解残渣，待净化.
6.2.1.3油料
称取试样10g（精确至0.01g）于100mL具塞量简中，加人20.0ml.乙睛，超声30min后，剧烈震荡2min，在室温下静置分层，从100mL具塞量简中准确吸取10.00mL乙精溶液，放人50mL圆底烧 瓶中，40C水浴真空旋转蒸发近干.加人4.0mL洗脱液（4.6）溶解残渣，待净化.
6.2.2净化
将氨基柱用4.0mL洗脱液（4.6）预洗条件化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即加人上述待净化溶液，用50mL圆底烧瓶收集洗脱液.用4.0mL洗脱液（4.6）洗残渣后淋洗氨基柱，并重复2次.将洗脱液40C水浴真空旋转蒸发近干，用甲醇定容至5.00mL.过0.22gm滤膜，待测.
6.3液相色谱一质谱联用测定
6.3.1色谱参考条件
a）色谱柱：C柱，100mm×2.1mm.1.7m；b）流动相A为含0.1%甲酸水溶液；B为乙晴；梯度洗脱条件见表1；c）柱温：35℃；d）进样体积：5gL; e）离子源类型：ESI；f）扫描方式：正离子扫描；g）检测方式：多反应监测；h）毛细管电压：3.0kV；j）去溶剂气温度：350℃； i）离子源温度：110℃；k）去溶剂气流量：900L/h；1）锥孔反吹气流量：50L/h；m）撞气（He）流速：0.21mL/min；n）监测离子对、碰撞气能量和去簇电压见表A.1.
表1梯度洗脱条件
时间min 0 0 满速mL/min 0.25 流动相A.% 90 流动相B % 101.0 0.25 40 604.5 5 0 0.25 0.25 25 40 60 756.5 0.25 25 757.5 8.5 0.25 0.25 90 90 10 10
6.3.2定性测定
在相同条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰保留时间与标准品相一致，并且在扣除背景后的样品谱图中，所选择的离子均出现，而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比相一致（相对丰度>50%，允许土20%偏差；相对丰度>20%，允许土25%偏差：相对丰度>10%，允许土30%偏差；相对 丰度≤10%，允许土50%偏差），即可判断为检出.
6.3.3定量测定
采用外标法一标准曲线法定量测定，为减少基质对定量测定的影响，定量应采用基质混合标准溶液绘制标准曲线，并且保证所测样品中农药的相应值均在仅器的线性范围内.5种农药总离子流图见图
