团体标 准
食品中霉菌和酵母快速计数
测试片法
Rapid enumeration of molds and yeasts in food
Dry rehydratable film method
中国出入境检验检疫协会发布
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任.
本文件由中国出入境检验检疫协会进出口食品标准化技术委员会（CIQA/TC10）提出并归口.
本文件起草单位：山东美正生物科技有限公司、国家食品安全风险评估中心、深圳海关食品检验检疫技术中心、通标标准技术服务有限公司、中农孚德检测技术（北京）有限公司、光明乳业股份有限公司、河南双汇投资发展股份有限公司、内蒙古伊利实业集团股份有限公司、内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司、元气森林（北京）食品科技集团有限公司、北京美正生物科技有限公司.
本文件主要起草人：陶文靖、王伟、王琦、付、吕敬章、肖晶、贾晨、许冉冉、李志君、王丹、孙丹丹、张娜、董彬、王剑铭、苏政、王蕊、吴萍、孙英丽、孙宏伟、刘磊、曲连海、凌空、刘赫东、周琦.
本文件知识产权归中国出入境检验检疫协会.任何单位或个人未经许可，不得以营利为目的，印制、出版、翻译、转发或复制全文或部分文字.
食品中霉菌和酵母快速计数测试片法
1范围
本文件规定了食品中霉菌和酵母测试片快速计数的方法.本文件适用于食品中霉菌和酵母的快速计数.
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB4789.1食品安全国家标准食品微生物学检验总则
GB4789.15食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数
GB4789.25食品安全国家标准食品微生物学检验酒类、饮料、冷冻饮品采样和检样处理
GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB19489实验室生物安全通用要求
3术语和定义
GB4789.15中界定的术语和定义适用于本文件.
4检测原理
MicroFast霉菌酵母测试片法是用一种预先制备的含有指示剂及冷水可溶性凝胶的培养基系统进行微生物培养的方法.培养基中含有霉菌和酵母生长的主要营养物质和功能性物质（如显色底物、冷水可溶性凝胶等）.霉菌和酵母生长过程中代谢产生的酶与测试片中的显色底物发生特异性反应释放显色基团，随霉菌和酵母生长，显色集团不断积累，显色效应逐渐增强，最终形成可见光下可计数的蓝绿色菌落.冷水可溶性凝胶遇水形成凝胶层，起固定营养与隔离保护作用.
5设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：5.1恒温培养箱：28°℃±1°℃5.2电子天平：感量0.1g.5.3 pH计或精密pH试纸.5.4均质器（拍击式）或等效的设备、无菌均质袋.5.5旋涡振荡器.5.6无菌移液管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）无菌移液管或移液器及无菌吸头.5.7无菌滤膜（直径47mm，孔径0.45μum）.5.8无菌锥形瓶（或其他合适容器）.5.9测试片压板装置.5.10膜过滤装置.5.11菌落计数装置：放大镜或低倍镜或全自动菌落计数仪等.5.12恒温装置：46°℃±1°℃.
6培养基和试剂
6.2磷酸盐缓冲液：见附录A.2.
6.3生理盐水：见附录A.3.
6.51mol/L氢氧化钠溶液：见附录A.5.
6.61mol/L盐酸溶液：见附录A.6.
6.7沙氏葡萄糖琼脂：见附录A.7.
7检验程序
具体操作程序见图1.
图1食品中霉菌和酵母快速计数测试片法操作程序
8操作步骤
8.1样品的稀释
8.1.1固体、半固体、液体样品：取25g（mL）样品，置于盛有225mL无菌稀释液（无菌水或生理盐水或磷酸盐缓冲液）的无菌锥形瓶（或其他适宜容器）中，充分混匀，或置于盛有225mL无菌稀释液的无菌均质袋内，用拍击式均质器拍打1min~2min，制成1:10的样
